661 W

661W is een van muizen afkomstige fotoreceptorcelijn die oorspronkelijk is ontwikkeld uit een retinale tumor die ontstond in een transgene muis die het grote T-antigeen van het simian virus 40 (SV40) tot expressie bracht onder controle van de promotor van het humane interfotoreceptor retinoïde-bindende eiwit (IRBP). De lijn is gegenereerd uit postnatale retinale explantaten en vertegenwoordigt geïmmortaliseerde kegelfotoreceptorvoorlopers. 661W-cellen vertonen adherente groei en worden routinematig onderhouden in Dulbecco's gemodificeerd Eagle-medium, aangevuld met foetaal runderserum onder standaard kweekomstandigheden. Ze worden veel gebruikt als in-vitromodel van kegelfotoreceptoren, met name in studies naar door licht veroorzaakte schade, oxidatieve stress, apoptose en retinale degeneratieve mechanismen.

Moleculaire en transcriptomische karakterisering bevestigt dat 661W-cellen de meeste kegelfotoreceptor-markers tot expressie brengen, waaronder kegelopsines en fototransductie-geassocieerde genen. Hoge-resolutie beeldvormingsstudies tonen aan dat deze cellen primaire cilia vormen met structurele kenmerken die doen denken aan fotoreceptorverbindende cilia en buitenste segmenten. Immunocytochemische en ultrastructurele analyses tonen de lokalisatie van ciliaire eiwitten in het axonema, het membraan en de overgangszone aan, wat hun bruikbaarheid bij het onderzoeken van retinale ciliopathieën ondersteunt. Functionele studies hebben aangetoond dat siRNA-gemedieerde knockdown van intraflagellaire transportgenen zoals Ift88 leidt tot verlies van cilia, wat 661W valideert als een hanteerbaar systeem voor mechanistische studies van ciliaire biologie.

661W-cellen zijn zeer gevoelig voor foto-oxidatieve stress. Blootstelling aan zichtbaar licht induceert apoptotische celdood die gepaard gaat met een verlaging van de NF-κB-activiteit en activering van caspase-routes. Overexpressie van anti-apoptotische eiwitten zoals Bcl-2 verleent resistentie tegen door licht geïnduceerde apoptose, waardoor de nucleaire activiteit van NF-κB behouden blijft en de celoverleving verbetert. Deze eigenschappen maken 661W tot een robuust model voor het ontrafelen van moleculaire routes die ten grondslag liggen aan fotoreceptordegeneratie. Het is belangrijk op te merken dat de 661W-lijn ook betrokken is geweest bij historische gevallen van verkeerde identificatie van cellijnen, waaronder kruisbesmetting met de RGC-5-lijn, wat de noodzaak van rigoureuze authenticatie bij het gebruik van dit model onderstreept. Al met al biedt 661W een goed gekarakteriseerd muizenplatform voor kegelvormige fotoreceptoren voor het bestuderen van retinale degeneratie, reacties op oxidatieve stress, ciliaire functie en therapeutische interventies gericht op het overleven van kegels.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring