661W

661W เป็นเซลล์ไลน์ที่สืบทอดมาจากเซลล์รับแสงชนิดโคนในตาของหนู ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกจากเนื้องอกในจอประสาทตาที่เกิดขึ้นในหนูดัดแปลงพันธุกรรมที่แสดงออกของแอนติเจน T ขนาดใหญ่ของไวรัสลิงซิมิอาน 40 (SV40) ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์โปรตีนจับเรตินอยด์ระหว่างเซลล์รับแสงของมนุษย์ (IRBP) เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นจากชิ้นเนื้อจอตาหลังคลอดและเป็นตัวแทนของเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์รับแสงชนิดกรวยที่คงสภาพอยู่ได้ 661W แสดงการเจริญเติบโตแบบเกาะติดและได้รับการเลี้ยงดูเป็นประจำในอาหารเลี้ยงเซลล์ Dulbecco's modified Eagle medium ที่เสริมด้วยเซรั่มจากเลือดลูกวัว 90% ภายใต้สภาวะการเลี้ยงเซลล์มาตรฐาน เซลล์นี้ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองของเซลล์รับแสงชนิดกรวย โดยเฉพาะในงานวิจัยเกี่ยวกับความเสียหายที่เกิดจากแสง ความเครียดออกซิเดชัน การตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และกลไกการเสื่อมของจอตา

การวิเคราะห์ลักษณะทางโมเลกุลและทรานสคริปโตมยืนยันว่าเซลล์ 661W แสดงออกของเครื่องหมายส่วนใหญ่ของเซลล์รับแสงกรวย รวมถึงโคนออปซินและยีนที่เกี่ยวข้องกับการถ่ายทอดสัญญาณแสง การศึกษาด้วยภาพความละเอียดสูงแสดงให้เห็นว่าเซลล์เหล่านี้สร้างซิเลียหลักที่มีลักษณะโครงสร้างคล้ายกับซิเลียเชื่อมต่อของเซลล์รับแสงและส่วนนอกของเซลล์ การวิเคราะห์ทางอิมมูโนไซโตเคมีและโครงสร้างระดับจุลภาคเผยให้เห็นการกระจายตัวของโปรตีนซิเลียไปยังแกนกลางของซิเลีย เยื่อหุ้มเซลล์ และบริเวณเปลี่ยนผ่าน ซึ่งสนับสนุนประโยชน์ในการศึกษาโรคซิเลียในจอประสาทตา การศึกษาเชิงหน้าที่แสดงให้เห็นว่าการยับยั้งยีนที่เกี่ยวข้องกับการขนส่งภายในแฟลเจลลัมด้วย siRNA เช่น Ift88 ส่งผลให้เกิดการสูญเสียซิเลีย ซึ่งยืนยันว่าเซลล์ 661W เป็นระบบที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาเชิงกลไกของชีววิทยาซิเลีย

เซลล์ 661W มีความไวสูงต่อความเครียดจากการออกซิเดชันด้วยแสง การสัมผัสกับแสงที่มองเห็นได้จะกระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสซึ่งเกี่ยวข้องกับการลดลงของกิจกรรม NF-κB และการกระตุ้นเส้นทางแคสเปส การแสดงออกของโปรตีนต้านอะพอพโทซิส เช่น Bcl-2 ในปริมาณมากเกินไปจะก่อให้เกิดความต้านทานต่อการตายของเซลล์ที่เกิดจากแสง โดยยังคงรักษาการทำงานของ NF-κB ในนิวเคลียสและเพิ่มการอยู่รอดของเซลล์ คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้ 661W เป็นแบบจำลองที่แข็งแกร่งสำหรับการวิเคราะห์เส้นทางโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเสื่อมของเซลล์รับแสง สิ่งสำคัญที่ควรทราบคือ สายพันธุ์ 661W ยังถูกพบว่ามีส่วนเกี่ยวข้องกับเหตุการณ์การระบุสายพันธุ์เซลล์ผิดพลาดในอดีต รวมถึงการปนเปื้อนข้ามกับสายพันธุ์ RGC-5 ซึ่งเน้นย้ำถึงความจำเป็นในการตรวจสอบความถูกต้องอย่างเข้มงวดเมื่อใช้โมเดลนี้ โดยรวมแล้ว สายพันธุ์ 661W ให้แพลตฟอร์มเซลล์รับแสงกรวยของหนูที่มีลักษณะเฉพาะอย่างดีสำหรับการศึกษาการเสื่อมของจอประสาทตา การตอบสนองต่อความเครียดออกซิเดชัน การทำงานของซิเลีย และการแทรกแซงทางบำบัดที่มุ่งเป้าไปที่การอยู่รอดของเซลล์รับแสงกรวย

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.