Skip to content
תאים A427
Tissue
ריאה
Disease
קרצינומה
Synonyms
A-427, A427N

Documents

תאים A427

Cell line · Product number 300111

A427 cells originate from lung tissue, specifically a carcinoma, exhibit epithelial morphology and grow adherently. A427 cells have a doubling time of app...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי A427 מקורם ברקמת ריאה, ובאופן ספציפי בקרצינומה, הם מציגים מורפולוגיה אפיתלית וצומחים באופן הדוק. לתאי A427 זמן הכפלה של כ-28 שעות במדיום RPMI 1640 בתוספת 10% סרום עגלי (FBS).

במדיום ACL-3, זמן הכפלה מתארך מעט ל-38 שעות, ואילו ב-ACL-3 בתוספת אלבומין סרום בקר (BSA), הוא מגיע ל-42 שעות. שינויים אלה בזמן הכפלה מספקים תובנות חשובות על התנהגות התאים בתנאי ניסוי שונים.

במעבר 60, תאי A427 מציגים קריוטיפ היפותריפלואידי עד היפרטריפלואידי. משמעות הדבר היא שהתאים בעלי כרומוזומים חריגים, כולל דיצנטריים, דקות וסימן סובטלוצנטרי גדול. חריגות קריוטיפיות כאלה קשורות לעתים קרובות לתאי סרטן ותורמות למאפיינים הייחודיים של קו תאים זה. תאי A427 מציגים תכונות טומורגניות, המאפשרות להם ליצור גידולים כאשר הם מוזרקים לעכברים עירומים.

גידולים אלה דומים לאדנוקרצינומה בלתי מובחנת, מה שמדגיש עוד יותר את הרלוונטיות של קו תאים זה לחקר סרטן הריאות והתקדמותו. בזכות תכונותיהם הייחודיות, תאי A427 נמצאים בשימוש ביישומים שונים, במיוחד במחקר הסרטן. המורפולוגיה האפיתלית שלהם ומקורם בריאות הופכים אותם למודל אידיאלי לחקר סרטן הריאות ומחלות נלוות. בנוסף, תאי A427 מתאימים היטב לטכניקות של תרבית תאים תלת-ממדית, המספקות סביבה פיזיולוגית רלוונטית יותר לחקר התנהגותם של תאי סרטן ריאות.

Tissue
ריאה
Disease
קרצינומה
Synonyms
  • A-427
  • A427N

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים. יוצר גידול לא מובחן המרמז על אדנוקרצינומה.
Karyotype
P60) היפותריפלואידי עד היפרטריפלואידי עם חריגות הכוללות דיצנטריות, דקות וסימון סובטלוצנטרי גדול

04Identifiers

Citation
A427 (מספר קטלוגי Cytion 300111)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 חיובי

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 3 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-4 x 104 תאים/סמ"ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
52 שנים
Ethnicity
קווקזי