תאים A427
Cell line · Product number 300111
A427 cells originate from lung tissue, specifically a carcinoma, exhibit epithelial morphology and grow adherently. A427 cells have a doubling time of app...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי A427 מקורם ברקמת ריאה, ובאופן ספציפי בקרצינומה, הם מציגים מורפולוגיה אפיתלית וצומחים באופן הדוק. לתאי A427 זמן הכפלה של כ-28 שעות במדיום RPMI 1640 בתוספת 10% סרום עגלי (FBS).
במדיום ACL-3, זמן הכפלה מתארך מעט ל-38 שעות, ואילו ב-ACL-3 בתוספת אלבומין סרום בקר (BSA), הוא מגיע ל-42 שעות. שינויים אלה בזמן הכפלה מספקים תובנות חשובות על התנהגות התאים בתנאי ניסוי שונים.
במעבר 60, תאי A427 מציגים קריוטיפ היפותריפלואידי עד היפרטריפלואידי. משמעות הדבר היא שהתאים בעלי כרומוזומים חריגים, כולל דיצנטריים, דקות וסימן סובטלוצנטרי גדול. חריגות קריוטיפיות כאלה קשורות לעתים קרובות לתאי סרטן ותורמות למאפיינים הייחודיים של קו תאים זה. תאי A427 מציגים תכונות טומורגניות, המאפשרות להם ליצור גידולים כאשר הם מוזרקים לעכברים עירומים.
גידולים אלה דומים לאדנוקרצינומה בלתי מובחנת, מה שמדגיש עוד יותר את הרלוונטיות של קו תאים זה לחקר סרטן הריאות והתקדמותו. בזכות תכונותיהם הייחודיות, תאי A427 נמצאים בשימוש ביישומים שונים, במיוחד במחקר הסרטן. המורפולוגיה האפיתלית שלהם ומקורם בריאות הופכים אותם למודל אידיאלי לחקר סרטן הריאות ומחלות נלוות. בנוסף, תאי A427 מתאימים היטב לטכניקות של תרבית תאים תלת-ממדית, המספקות סביבה פיזיולוגית רלוונטית יותר לחקר התנהגותם של תאי סרטן ריאות.
- Tissue
- ריאה
- Disease
- קרצינומה
- Synonyms
- A-427
- A427N
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים. יוצר גידול לא מובחן המרמז על אדנוקרצינומה.
- Karyotype
- P60) היפותריפלואידי עד היפרטריפלואידי עם חריגות הכוללות דיצנטריות, דקות וסימון סובטלוצנטרי גדול
04Identifiers
- Citation
- A427 (מספר קטלוגי Cytion 300111)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1055
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 חיובי
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 3 ימים.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-4 x 104 תאים/סמ"ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 52 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
