الانتقال إلى المحتوى
خلايا A427
الأنسجة
الرئة
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
A-427, A427N

المستندات

خلايا A427

Cell line · رقم المنتج 300111

تنشأ خلايا A427 من نسيج الرئة، وتحديدًا من ورم سرطاني، وتتميز بمورفولوجيا ظهارية وتنمو بشكل ملتصق. ويبلغ زمن مضاعفة خلايا A427 حوالي...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تنشأ خلايا A427 من أنسجة الرئة، وتحديداً السرطان، وتُظهر مورفولوجيا طلائية وتنمو بشكل ملتصق. تبلغ مدة مضاعفة خلايا A427 حوالي 28 ساعة في وسط RPMI 1640 المضاف إليه مصل بقري جنيني بنسبة 10% (FBS).

في وسط ACL-3، يمتد وقت المضاعفة قليلاً إلى 38 ساعة، بينما يصل وقت المضاعفة في وسط ACL-3 المضاف إليه زلال مصل البقر (BSA) إلى 42 ساعة. توفر هذه الاختلافات في زمن التضاعف رؤى قيمة حول سلوك الخلايا في ظل ظروف تجريبية مختلفة.

عند مرور 60 ساعة، تُظهر خلايا A427 نمطًا نوويًا ناقص الصبغيات إلى مفرط الصبغيات. وهذا يعني أن الخلايا تحتوي على كروموسومات غير طبيعية، بما في ذلك كروموسومات ثنائية الصبغيات ودقائق وعلامة كبيرة تحت مركزية فرعية. وغالباً ما ترتبط هذه التشوهات في النمط النووي بالخلايا السرطانية وتساهم في الخصائص الفريدة لهذا الخط الخلوي. تُظهر خلايا A427 خصائص مولدة للأورام، مما يسمح لها بتكوين أورام عند حقنها في فئران عارية.

وتشبه هذه الأورام السرطان الغدي غير المتمايز، مما يؤكد أهمية هذا الخط الخلوي في دراسة سرطان الرئة وتطوره. وبفضل ميزاتها الاستثنائية، تجد خلايا A427 فائدة في تطبيقات مختلفة، لا سيما في أبحاث السرطان. إن مورفولوجية الخلايا الظهارية وأصلها الرئوي يجعلها نموذجًا مثاليًا لدراسة سرطان الرئة والأمراض ذات الصلة. بالإضافة إلى ذلك، فإن خلايا A427 مناسبة تمامًا لتقنيات زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، مما يوفر بيئة أكثر ملاءمة من الناحية الفسيولوجية لاستكشاف سلوك خلايا سرطان الرئة.

الأنسجة
الرئة
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
  • A-427
  • A427N

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية. يشكل ورماً غير متمايز يوحي بسرطان غدي.
النمط الكروموسومي
P60) ناقص الصيغة الصبغية إلى مفرط الصيغة الصبغية مع وجود تشوهات بما في ذلك ثنائية المركز، ودقائق وعلامات فرعية كبيرة

04المعرّفات

المرجع
A427 (كتالوج سيتيون رقم 300111)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1055

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
P53 إيجابي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 3 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 4 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
52 سنة
الأصل العرقي
قوقازي