Mine otse sisu juurde
A427 rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
A-427, A427N

Dokumendid

A427 rakud

Cell line · Toote number 300111

A427-rakud pärinevad kopsukoesest, täpsemalt kartsinoomist, neil on epiteelne morfoloogia ja nad kasvavad adhesiivselt. A427-rakkude kahekordistumisaeg on umbes...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

A427 rakud pärinevad kopsukoes, täpsemalt kartsinoomist, omavad epiteeli morfoloogiat ja kasvavad adhesiivselt. A427 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 28 tundi RPMI 1640 keskkonnas, mida on täiendatud 10% veiste loote seerumiga (FBS).

ACL-3 keskkonnas on kahekordistumisaeg veidi pikenenud 38 tunnini, samas kui ACL-3 keskkonnas, mida on täiendatud veiste seerumi albumiiniga (BSA), ulatub see 42 tunnini. Need erinevused kahekordistumisaegades annavad väärtusliku ülevaate rakkude käitumisest erinevates katsetingimustes.

Passaaži 60 korral on A427 rakkudel hüpotriploidne kuni hüpertriploidne karüotüüp. See tähendab, et rakkudel on ebanormaalsed kromosoomid, sealhulgas ditsentrilised kromosoomid, minutid ja suur subtelotsentriline marker. Selliseid karyotüübi kõrvalekaldeid seostatakse sageli vähirakkudega ja need aitavad kaasa selle rakuliini ainulaadsete omaduste kujunemisele. A427 rakkudel on tumorigeensed omadused, mis võimaldavad neil nude hiirtele süstimisel moodustada kasvajaid.

Need kasvajad sarnanevad diferentseerimata adenokartsinoomiga, mis rõhutab veelgi selle rakuliini tähtsust kopsuvähi ja selle progresseerumise uurimisel. Tänu oma erakordsetele omadustele leiavad A427 rakud kasutust erinevates rakendustes, eelkõige vähiuuringutes. Nende epiteliaalne morfoloogia ja kopsude päritolu teevad neist ideaalse mudeli kopsuvähi ja sellega seotud haiguste uurimiseks. Lisaks sellele sobivad A427 rakud hästi 3D rakukultuurimeetodite jaoks, pakkudes füsioloogiliselt asjakohasemat keskkonda kopsuvähirakkude käitumise uurimiseks.

Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • A-427
  • A427N

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel. Moodustab diferentseerimata kasvaja, mis viitab adenokartsinoomile.
Karyotüüp
P60) hüpotriploid kuni hüpertriploid, millel on kõrvalekaldeid, sealhulgas ditsentrilised, minutilised ja suured subtelotsentrilised markerid

04Tunnused

Viide
A427 (Cytioni katalooginumber 300111)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 positiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 3 päeva jooksul konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 4 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
52 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia