Клетки A427
Cell line · Номер на продукта 300111
Клетките A427 произхождат от белодробна тъкан, по-конкретно от карцином, притежават епителна морфология и растат чрез адхезия. Клетките A427 имат време за удвояване от приблизително...
Персонализиране / Препоръки
- Клетки A427Cell line€430.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
Клетките A427 произхождат от белодробна тъкан, по-специално от карцином, имат епителна морфология и растат прилепващо. Времето за удвояване на клетките A427 е приблизително 28 часа в среда RPMI 1640, допълнена с 10% фетален говежди серум (FBS).
В среда ACL-3 времето за удвояване леко се удължава до 38 часа, докато в ACL-3, допълнена с говежди серумен албумин (BSA), то достига 42 часа. Тези вариации във времето за удвояване дават ценна представа за поведението на клетките при различни експериментални условия.
На 60-ия стадий клетките A427 показват хипотриплоиден до хипертриплоиден кариотип. Това означава, че клетките притежават анормални хромозоми, включително дицентрици, минути и голям субтелоцентричен маркер. Такива кариотипни аномалии често се свързват с раковите клетки и допринасят за уникалните характеристики на тази клетъчна линия. Клетките A427 проявяват туморогенни свойства, което им позволява да образуват тумори при инжектиране в голи мишки.
Тези тумори приличат на недиференциран аденокарцином, което допълнително подчертава значението на тази клетъчна линия за изучаване на белодробния рак и неговата прогресия. Със своите изключителни характеристики клетките A427 намират приложение в различни области, особено в изследванията на рака. Тяхната епителна морфология и белодробен произход ги превръщат в идеален модел за изучаване на белодробния рак и свързаните с него заболявания. Освен това клетките A427 са подходящи за 3D техники за клетъчно култивиране, като осигуряват по-физиологична среда за изследване на поведението на клетките на белодробния рак.
- Тъкан
- Бял дроб
- Заболяване
- Карцином
- Синоними
- A-427
- A427N
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
- Туморогенен
- Да, при голи мишки. Образува недиференциран тумор, предполагащ аденокарцином.
- Кариотип
- P60) хипотриплоиден до хипертриплоиден с аномалии, включително дицентрици, минути и голям субтелоцентричен маркер
04Идентификатори
- Източник
- A427 (каталожен номер 300111 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_1055
05Проява и предразположеност
- Експресия на протеини
- P53 положителен
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Плътност на засяването
- 1 x 104 клетки/cm2 ще доведе до конфлуентен монослой в рамките на 3 дни.
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Възстановяване след размразяване
- След размразяване, разположете клетките на 4 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Възраст на донора
- 52 години
- Етническа принадлежност
- Кавказки
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
