Ga naar de inhoud
A427 Cellen
Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
A-427, A427N

Documenten

A427 Cellen

Cell line · Productnummer 300111

A427-cellen zijn afkomstig uit longweefsel, meer bepaald uit een carcinoom, vertonen een epitheliale morfologie en groeien door hechting. A427-cellen hebben een verdubbelingstijd van ongeveer...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

A427 cellen zijn afkomstig van longweefsel, specifiek een carcinoom, vertonen een epitheliale morfologie en groeien adherent. A427 cellen hebben een verdubbelingstijd van ongeveer 28 uur in RPMI 1640 medium aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS).

In ACL-3 medium wordt de verdubbelingstijd iets verlengd tot 38 uur, terwijl deze in ACL-3 aangevuld met runderserumalbumine (BSA) 42 uur bedraagt. Deze variaties in verdubbelingstijd bieden waardevolle inzichten in het gedrag van de cellen onder verschillende experimentele omstandigheden.

Bij passage 60 vertonen A427-cellen een hypotriploïd tot hypertriploïd karyotype. Dit betekent dat de cellen abnormale chromosomen bezitten, waaronder dicentrische chromosomen, minuten en een grote subtelocentrische marker. Dergelijke karyotypische afwijkingen worden vaak geassocieerd met kankercellen en dragen bij aan de unieke eigenschappen van deze cellijn. A427-cellen vertonen tumorigene eigenschappen, waardoor ze tumoren kunnen vormen wanneer ze in naaktmuizen worden geïnjecteerd.

Deze tumoren lijken op ongedifferentieerd adenocarcinoom, wat de relevantie van deze cellijn voor het bestuderen van longkanker en de progressie ervan verder benadrukt. Met zijn uitzonderlijke eigenschappen zijn A427 cellen bruikbaar in verschillende toepassingen, met name in kankeronderzoek. Hun epitheliale morfologie en long oorsprong maken ze een ideaal model voor het bestuderen van longkanker en aanverwante ziekten. Bovendien zijn A427-cellen zeer geschikt voor 3D-celkweektechnieken, waardoor een meer fysiologisch relevante omgeving ontstaat om het gedrag van longkankercellen te onderzoeken.

Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
  • A-427
  • A427N

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen. Vormt een ongedifferentieerde tumor die op een adenocarcinoom lijkt.
Karyotype
P60) hypotriploïd tot hypertriploïd met afwijkingen zoals dicentrisch, minuten en grote subtelocentrische marker

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
A427 (Cytion catalogusnummer 300111)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53-positief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 resulteert binnen 3 dagen in een confluente monolaag.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 4 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
52 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch