Přejít na obsah
A427 Buňky
Tkáň
Plíce
Nemoc
Karcinom
Synonyma
A-427, A427N

Dokumenty

A427 Buňky

Cell line · Číslo výrobku 300111

Buňky A427 pocházejí z plicní tkáně, konkrétně z karcinomu, vykazují epiteliální morfologii a rostou adhezivně. Doba zdvojnásobení buněk A427 činí přibližně...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky A427 pocházejí z plicní tkáně, konkrétně z karcinomu, vykazují epiteliální morfologii a rostou adherentně. Buňky A427 mají dobu zdvojení přibližně 28 hodin v médiu RPMI 1640 doplněném 10% fetálním hovězím sérem (FBS).

V médiu ACL-3 se doba zdvojení mírně prodlužuje na 38 hodin, zatímco v médiu ACL-3 doplněném bovinním sérovým albuminem (BSA) dosahuje 42 hodin. Tyto rozdíly v době zdvojení poskytují cenné informace o chování buněk za různých experimentálních podmínek.

Při 60. průchodu vykazují buňky A427 hypotriploidní až hypertriploidní karyotyp. To znamená, že buňky mají abnormální chromozomy, včetně dicentrických, minutových a velkého subtelocentrického markeru. Tyto abnormality karyotypu jsou často spojovány s nádorovými buňkami a přispívají k jedinečným vlastnostem této buněčné linie. Buňky A427 vykazují tumorigenní vlastnosti, které jim umožňují vytvářet nádory po injekčním podání nahým myším.

Tyto nádory se podobají nediferencovanému adenokarcinomu, což dále zdůrazňuje význam této buněčné linie pro studium rakoviny plic a její progrese. Díky svým výjimečným vlastnostem nacházejí buňky A427 uplatnění v různých aplikacích, zejména ve výzkumu rakoviny. Jejich epiteliální morfologie a plicní původ z nich činí ideální model pro studium rakoviny plic a souvisejících onemocnění. Kromě toho jsou buňky A427 vhodné pro techniky 3D buněčných kultur, které poskytují fyziologicky relevantnější prostředí pro zkoumání chování buněk rakoviny plic.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Karcinom
Synonyma
  • A-427
  • A427N

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, na nahých myších. Tvoří nediferencovaný nádor naznačující adenokarcinom.
Karyotyp
P60) hypotriploidní až hypertriploidní s abnormalitami včetně dicentrik, minut a velkých subtelocentrických markerů

04Identifikátory

Citace
A427 (katalogové číslo Cytion 300111)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 pozitivní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří do 3 dnů konfluentní monovrstvu.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 4 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
52 let
Etnická příslušnost
Kavkazský