A427 細胞
Cell line · Product number 300111
A427 cells originate from lung tissue, specifically a carcinoma, exhibit epithelial morphology and grow adherently. A427 cells have a doubling time of app...
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01General information
- Description
A427 細胞源自肺組織，具體而言為肺癌組織，具有上皮細胞形態，並以黏著方式生長。在添加 10% 胎牛血清（FBS）的 RPMI 1640 培養基中，A427 細胞的倍增時間約為 28 小時。
在 ACL-3 培養基中，倍增時間略微延長至 38 小時；而在添加牛血清白蛋白（BSA）的 ACL-3 培養基中，則延長至 42 小時。這些倍增時間的變化，為理解細胞在不同實驗條件下的行為提供了寶貴的見解。
在第 60 代傳代時，A427 細胞呈現低三倍體至高三倍體的核型。這意味著細胞具有異常染色體，包括雙著絲點染色體、微小染色體以及一個大型亞端粒標記。此類核型異常常與癌細胞相關，並造就了該細胞系的獨特特性。 A427 細胞具有致瘤性，當注入裸鼠體內時可形成腫瘤。
這些腫瘤類似於未分化的腺癌，進一步凸顯了該細胞系在研究肺癌及其進展方面的相關性。憑藉其獨特特性，A427 細胞在各種應用中皆具實用價值，特別是在癌症研究領域。其上皮形態及源自肺部的特性，使其成為研究肺癌及相關疾病的理想模型。 此外，A427 細胞非常適合用於 3D 細胞培養技術，能提供更貼近生理環境的條件，以探索肺癌細胞的行為。
- Tissue
- 肺
- Disease
- 癌
- Synonyms
- A-427
- A427N
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Tumourigenic
- 是的，在裸鼠身上。會形成一種未分化的腫瘤，其特徵與腺癌相似。
- Karyotype
- P60) 從低三倍體到高三倍體，伴有異常現象，包括雙著絲點染色體、微小染色體及大型亞端粒標記
04Identifiers
- Citation
- A427（Cytion 型號 300111）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1055
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 陽性
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 個細胞/cm² 將在 3 天內形成密合的單層細胞。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 4 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 52年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes