Gå direkt till innehållet
A427-celler
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Carcinom
Synonymer
A-427, A427N

A427-celler

Cell line · Produktnummer 300111

A427-cellerna härstammar från lungvävnad, närmare bestämt ett karcinom, uppvisar epitelial morfologi och växer i vidhäftning. A427-cellerna har en fördubblingstid på ungefär...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

A427-cellerna härrör från lungvävnad, specifikt ett karcinom, uppvisar epitelial morfologi och växer adherent. A427-cellerna har en fördubblingstid på cirka 28 timmar i RPMI 1640-medium kompletterat med 10% fetalt bovint serum (FBS).

I ACL-3-medium förlängs fördubblingstiden något till 38 timmar, medan den i ACL-3 kompletterat med bovint serumalbumin (BSA) når 42 timmar. Dessa variationer i fördubblingstid ger värdefulla insikter om cellernas beteende under olika experimentella förhållanden.

Vid passage 60 uppvisar A427-cellerna en hypotriploid till hypertriploid karyotyp. Detta innebär att cellerna har onormala kromosomer, inklusive dikentriker, minuter och en stor subtelocentrisk markör. Sådana karyotypiska abnormiteter förknippas ofta med cancerceller och bidrar till de unika egenskaperna hos denna cellinje. A427-cellerna uppvisar tumörframkallande egenskaper, vilket gör att de kan bilda tumörer när de injiceras i nakna möss.

Dessa tumörer liknar odifferentierade adenokarcinom, vilket ytterligare understryker relevansen av denna cellinje för studier av lungcancer och dess utveckling. Med sina exceptionella egenskaper är A427-cellerna användbara i olika tillämpningar, särskilt inom cancerforskningen. Deras epiteliala morfologi och lungursprung gör dem till en idealisk modell för att studera lungcancer och relaterade sjukdomar. Dessutom är A427-cellerna väl lämpade för 3D-cellodlingstekniker, vilket ger en mer fysiologiskt relevant miljö för att utforska lungcancercellernas beteende.

Vävnad
Lungan
Sjukdom
Carcinom
Synonymer
  • A-427
  • A427N

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss. Bildar en odifferentierad tumör som tyder på adenokarcinom.
Karyotyp
P60) hypotriploid till hypertriploid med avvikelser inklusive dikentriker, minuter och stor subtelocentrisk markör

04Identifierare

Källa
A427 (Cytion katalognummer 300111)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
P53-positiv

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2 resulterar i ett konfluent monolager inom 3 dagar.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 4 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
52 år
Etnicitet
Kaukasisk