Gå direkte til indholdet
A427-celler
Væv
Lunge
Sygdom
Karcinom
Synonymer
A-427, A427N

Dokumenter

A427-celler

Cell line · Varenummer 300111

A427-celler stammer fra lungevæv, nærmere bestemt et karcinom, udviser epitelial morfologi og vokser ved vedhæftning. A427-celler har en fordoblingstid på ca...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

A427-celler stammer fra lungevæv, specifikt et karcinom, udviser epitelmorfologi og vokser adhærent. A427-celler har en fordoblingstid på ca. 28 timer i RPMI 1640-medium suppleret med 10 % føtalt bovint serum (FBS).

I ACL-3-medium forlænges fordoblingstiden en smule til 38 timer, mens den i ACL-3 suppleret med bovint serumalbumin (BSA) når op på 42 timer. Disse variationer i fordoblingstiden giver værdifuld indsigt i cellernes adfærd under forskellige eksperimentelle forhold.

Ved passage 60 udviser A427-celler en hypotriploid til hypertriploid karyotype. Det betyder, at cellerne har unormale kromosomer, herunder dicentriske, minutter og en stor subtelocentrisk markør. Sådanne karyotypiske abnormiteter er ofte forbundet med kræftceller og bidrager til de unikke egenskaber ved denne cellelinje. A427-celler udviser tumorigeniske egenskaber, så de kan danne tumorer, når de injiceres i nøgne mus.

Disse tumorer ligner udifferentierede adenokarcinomer, hvilket yderligere understreger relevansen af denne cellelinje i studiet af lungekræft og dens udvikling. Med sine enestående egenskaber er A427-cellerne anvendelige i forskellige sammenhænge, især inden for kræftforskning. Deres epitelmorfologi og lungeoprindelse gør dem til en ideel model til undersøgelse af lungekræft og relaterede sygdomme. Derudover er A427-celler velegnede til 3D-cellekulturteknikker, hvilket giver et mere fysiologisk relevant miljø til at udforske lungekræftcellers adfærd.

Væv
Lunge
Sygdom
Karcinom
Synonymer
  • A-427
  • A427N

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus. Danner en udifferentieret tumor, der tyder på adenokarcinom.
Karyotype
P60) hypotriploid til hypertriploid med abnormiteter, herunder dicentrik, minutter og stor subtelocentrisk markør

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A427 (Cytion katalognummer 300111)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53-positiv

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenhængende monolag inden for 3 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 4 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
52 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk