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A427細胞
ティッシュ
肺
病気
癌腫
同義語
A-427, A427N

A427細胞

Cell line · 製品番号 300111

A427細胞は肺組織、具体的には肺癌に由来し、上皮様形態を示し、付着性増殖を行う。A427細胞の倍加時間は約...

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01概要

説明

A427細胞は肺組織、特に癌腫に由来し、上皮形態を示し、接着性に増殖する。A427細胞は、10%ウシ胎児血清(FBS)添加RPMI1640培地では約28時間で倍加する。

ACL-3培地では、倍加時間は38時間とやや延長され、ウシ血清アルブミン(BSA)を添加したACL-3では42時間に達する。このような倍加時間の変化から、異なる実験条件下での細胞の挙動に関する貴重な知見が得られる。

継代60で、A427細胞は低3倍体から超3倍体の核型を示す。これは、細胞が二分体、分数体、大きなサブテロセントリックマーカーを含む異常染色体を持つことを意味する。このような核型の異常はしばしば癌細胞と関連しており、この細胞株のユニークな特徴の一因となっている。A427細胞は腫瘍形成性を示し、ヌードマウスに注入すると腫瘍を形成する。

これらの腫瘍は未分化の腺癌に似ており、肺癌とその進行の研究におけるこの細胞株の関連性をさらに強調している。A427細胞はその卓越した特徴から、様々な用途、特に癌研究に有用である。その上皮形態と肺由来であることから、肺がんおよび関連疾患の研究に理想的なモデルとなる。さらに、A427細胞は3次元細胞培養技術に適しており、肺がん細胞の挙動を調べるためにより生理学的に適切な環境を提供する。

ティッシュ
肺
病気
癌腫
同義語
  • A-427
  • A427N

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。腺癌を示唆する未分化な腫瘍を形成する。
核型
P60) 二中心、分、大きなサブテロセントリックマーカーを含む異常を伴う低三倍体から倍数体。

04識別子

引用
A427 (Cytion カタログ番号 300111)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1055

05発現と感受性

タンパク質の発現
P53陽性

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1×10⁴細胞/cm²では、3日以内にコンフルエントな単層が形成される。
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を4×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
52年
民族
白人