เซลล์ A427
Cell line · Product number 300111
A427 cells originate from lung tissue, specifically a carcinoma, exhibit epithelial morphology and grow adherently. A427 cells have a doubling time of app...
Customization / Recommendations
- เซลล์ A427Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ A427 มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อปอด โดยเฉพาะอย่างยิ่งมะเร็งชนิดคาร์ซิโนมา มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุผิว และเจริญเติบโตแบบเกาะติด เซลล์ A427 มีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าประมาณ 28 ชั่วโมงในอาหารเลี้ยงเซลล์ RPMI 1640 ที่เสริมด้วยเซรั่มจากเลือดลูกวัว 10% (FBS)
ในอาหารเลี้ยงเซลล์ ACL-3 ระยะเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าจะเพิ่มขึ้นเล็กน้อยเป็น 38 ชั่วโมง ในขณะที่ในอาหารเลี้ยงเซลล์ ACL-3 ที่เสริมด้วยอัลบูมินจากซีรัมวัว (BSA) จะเพิ่มขึ้นถึง 42 ชั่วโมง ความแตกต่างของระยะเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่านี้ให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีคุณค่าเกี่ยวกับพฤติกรรมของเซลล์ภายใต้สภาวะการทดลองที่แตกต่างกัน
ที่ผ่าน 60 เซลล์ A427 แสดงลักษณะโครโมโซมเป็นแบบไฮโปทริปพลอยด์ถึงไฮเปอร์ทริปพลอยด์ ซึ่งหมายความว่าเซลล์เหล่านี้มีโครโมโซมผิดปกติ รวมถึงไดเซนทริกส์ มินิ และเครื่องหมายซับเทเลเซนทริกขนาดใหญ่ ความผิดปกติของโครโมโซมดังกล่าวมักเกี่ยวข้องกับเซลล์มะเร็งและมีส่วนทำให้เกิดลักษณะเฉพาะของสายเซลล์นี้ เซลล์ A427 แสดงคุณสมบัติในการก่อเนื้องอก ทำให้สามารถก่อตัวเป็นเนื้องอกเมื่อฉีดเข้าไปในหนูที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน
เนื้องอกเหล่านี้มีลักษณะคล้ายกับอะดีโนคาร์ซิโนมาที่ยังไม่แยกตัวชัดเจน ซึ่งยิ่งเน้นย้ำถึงความสำคัญของเซลล์ไลน์นี้ในการศึกษาโรคมะเร็งปอดและการลุกลามของโรค ด้วยคุณลักษณะที่โดดเด่น เซลล์ A427 จึงมีประโยชน์ในหลากหลายการประยุกต์ใช้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในงานวิจัยด้านมะเร็ง ลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุผิวและแหล่งกำเนิดจากปอดทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งปอดและโรคที่เกี่ยวข้องนอกจากนี้ เซลล์ A427 ยังเหมาะสำหรับเทคนิคการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ ซึ่งให้สภาพแวดล้อมที่มีความเกี่ยวข้องทางสรีรวิทยามากขึ้นในการศึกษาพฤติกรรมของเซลล์มะเร็งปอด
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
- Synonyms
- A-427
- A427N
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน สามารถก่อให้เกิดเนื้องอกที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงเป็นลักษณะเฉพาะ ซึ่งบ่งชี้ถึงมะเร็งชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา
- Karyotype
- P60) มีจำนวนโครโมโซม 3 เท่าตัวต่ำถึงสูงผิดปกติ โดยมีความผิดปกติรวมถึงโครโมโซมที่มีแขนคู่สองจุด (dicentric), โครโมโซมขนาดเล็กมากและขนาดใหญ่ที่อยู่บริเวณใกล้ศูนย์กลางของโครโมโซม (subtelocentric marker)
04Identifiers
- Citation
- A427 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300111)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1055
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 เป็นบวก
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเซลล์เดียวที่หนาแน่นภายใน 3 วัน
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 4 x 104 เซลล์/ซม. และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 52 ปี
- Ethnicity
- คอเคเชียน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
