Pereiti prie turinio
A427 ląstelės
Audinys
Plaučiai
Liga
Karcinoma
Sinonimai
A-427, A427N

Dokumentai

A427 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300111

A427 ląstelės kilusios iš plaučių audinio, tiksliau – iš karcinomos, pasižymi epiteline morfologija ir auga adhezyviai. A427 ląstelių dvigubėjimo laikas yra apytikriai...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

A427 ląstelės yra kilusios iš plaučių audinio, konkrečiai iš karcinomos, pasižymi epitelio morfologija ir auga adherentiškai. A427 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 28 valandos RPMI 1640 terpėje, papildytoje 10 % fetalinio galvijų serumo (FBS).

ACL-3 terpėje padvigubėjimo laikas šiek tiek pailgėja iki 38 valandų, o ACL-3 terpėje, papildytoje galvijų serumo albuminu (BSA), - iki 42 valandų. Šie padvigubėjimo trukmės skirtumai suteikia vertingų žinių apie ląstelių elgseną skirtingomis eksperimentinėmis sąlygomis.

Kai A427 ląstelės būna 60-ties metų, jų kariotipas būna nuo hipotriploidinio iki hipertriploidinio. Tai reiškia, kad ląstelės turi neįprastų chromosomų, įskaitant dicentrikas, minutes ir didelį subtelocentrinį žymenį. Tokios kariotipo anomalijos dažnai būna susijusios su vėžinėmis ląstelėmis ir lemia unikalias šios ląstelių linijos savybes. A427 ląstelės pasižymi navikinėmis savybėmis, todėl įšvirkštos į nuogas peles jos suformuoja navikus.

Šie navikai panašūs į nediferencijuotą adenokarcinomą, o tai dar labiau pabrėžia šios ląstelių linijos svarbą tiriant plaučių vėžį ir jo progresavimą. A427 ląstelės pasižymi išskirtinėmis savybėmis, todėl jas galima panaudoti įvairiose srityse, ypač vėžio tyrimuose. Dėl jų epitelio morfologijos ir plaučių kilmės jos yra idealus modelis plaučių vėžiui ir su juo susijusioms ligoms tirti. Be to, A427 ląstelės puikiai tinka 3D ląstelių auginimo metodams, todėl plaučių vėžio ląstelių elgsenai tirti sukuriama fiziologiškai tinkamesnė aplinka.

Audinys
Plaučiai
Liga
Karcinoma
Sinonimai
  • A-427
  • A427N

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms. Formuojasi nediferencijuotas navikas, panašus į adenokarcinomą.
Kariotipas
P60) nuo hipotriploidinio iki hipertriploidinio su anomalijomis, įskaitant dicentriką, minutes ir dideles subtelocentrines žymes

04Identifikatoriai

Nuoroda
A427 (Cytion katalogo numeris 300111)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per 3 dienas suformuos konfluentinį monosluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 4 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
52 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių