Komórki A427
Cell line · Numer produktu 300111
Komórki A427 pochodzą z tkanki płucnej, a konkretnie z nowotworu złośliwego, charakteryzują się morfologią nabłonkową i rosną w sposób adhezyjny. Czas podwojenia komórek A427 wynosi około...
Dostosowanie / Zalecenia
- Komórki A427Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Komórki A427 pochodzą z tkanki płucnej, w szczególności z raka, wykazują morfologię nabłonkową i rosną przylegająco. Czas podwojenia komórek A427 wynosi około 28 godzin w pożywce RPMI 1640 uzupełnionej 10% płodową surowicą bydlęcą (FBS).
W pożywce ACL-3 czas podwojenia wydłuża się nieznacznie do 38 godzin, podczas gdy w pożywce ACL-3 uzupełnionej albuminą surowicy bydlęcej (BSA) osiąga 42 godziny. Te różnice w czasie podwojenia zapewniają cenny wgląd w zachowanie komórek w różnych warunkach eksperymentalnych.
Przy przejściu 60, komórki A427 wykazują kariotyp od hipotriploidalnego do hipertriploidalnego. Oznacza to, że komórki posiadają nieprawidłowe chromosomy, w tym dicentryczne, minutowe i duży marker subtelocentryczny. Takie nieprawidłowości kariotypu są często związane z komórkami nowotworowymi i przyczyniają się do unikalnych cech tej linii komórkowej. Komórki A427 wykazują właściwości nowotworowe, pozwalając im na tworzenie guzów po wstrzyknięciu do nagich myszy.
Guzy te przypominają niezróżnicowanego gruczolakoraka, co dodatkowo podkreśla znaczenie tej linii komórkowej w badaniu raka płuc i jego progresji. Dzięki swoim wyjątkowym cechom, komórki A427 znajdują zastosowanie w różnych aplikacjach, szczególnie w badaniach nad rakiem. Ich nabłonkowa morfologia i pochodzenie z płuc sprawiają, że są idealnym modelem do badania raka płuc i chorób pokrewnych. Ponadto, komórki A427 są dobrze przystosowane do technik hodowli komórkowej 3D, zapewniając bardziej fizjologiczne środowisko do badania zachowania komórek raka płuc.
- Chusteczka
- Płuco
- Choroba
- Rak
- Synonimy
- A-427
- A427N
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Nowotworotwórczy
- Tak, u nagich myszy. Tworzy niezróżnicowany guz sugerujący gruczolakoraka.
- Karyotyp
- P60) hipotriploidalne do hipertriploidalnych z nieprawidłowościami, w tym dicentryczne, minuty i duży marker subtelocentryczny
04Identyfikatory
- Źródło
- A427 (numer katalogowy Cytion 300111)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1055
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja białek
- P53 dodatni
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie zlewającej się monowarstwy w ciągu 3 dni.
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 4 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 52 lata
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
