Células A427

As células A427 são originárias do tecido pulmonar, especificamente de um carcinoma, apresentam morfologia epitelial e crescem por adesão. As células A427 têm um tempo de duplicação de aproximadamente 28 horas no meio RPMI 1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS).

No meio ACL-3, o tempo de duplicação é ligeiramente prolongado para 38 horas, enquanto no meio ACL-3 suplementado com albumina sérica bovina (BSA), chega a 42 horas. Essas variações no tempo de duplicação fornecem informações valiosas sobre o comportamento celular sob diferentes condições experimentais.

Na passagem 60, as células A427 apresentam um cariótipo hipotriploide a hipertriploide. Isso significa que as células possuem cromossomos anormais, incluindo dicêntricos, minúsculos e um grande marcador subtelocêntrico. Tais anomalias cariotípicas são frequentemente associadas a células cancerosas e contribuem para as características únicas dessa linhagem celular. As células A427 exibem propriedades tumorigênicas, o que lhes permite formar tumores quando injetadas em camundongos nude.

Esses tumores se assemelham a um adenocarcinoma indiferenciado, o que reforça ainda mais a relevância dessa linhagem celular no estudo do câncer de pulmão e de sua progressão. Com suas características excepcionais, as células A427 encontram utilidade em diversas aplicações, particularmente na pesquisa sobre o câncer. Sua morfologia epitelial e origem pulmonar as tornam um modelo ideal para o estudo do câncer de pulmão e de doenças relacionadas. Além disso, as células A427 são adequadas para técnicas de cultura celular 3D, proporcionando um ambiente fisiologicamente mais relevante para explorar o comportamento das células do câncer de pulmão.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.