Células A427
Cell line · Número do produto 300111
As células A427 têm origem no tecido pulmonar, mais concretamente num carcinoma, apresentam morfologia epitelial e crescem por aderência. As células A427 têm um tempo de duplicação de aprox...
Personalização / Recomendações
- Células A427Cell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
As células A427 são originárias de tecido pulmonar, especificamente de um carcinoma, apresentam morfologia epitelial e crescem de forma aderente. As células A427 têm um tempo de duplicação de aproximadamente 28 horas em meio RPMI 1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS).
Em meio ACL-3, o tempo de duplicação é ligeiramente alargado para 38 horas, enquanto em ACL-3 suplementado com albumina de soro bovino (BSA), atinge 42 horas. Estas variações no tempo de duplicação fornecem informações valiosas sobre o comportamento das células em diferentes condições experimentais.
Na passagem 60, as células A427 apresentam um cariótipo hipotriplóide a hipertriplóide. Isto significa que as células possuem cromossomas anormais, incluindo dicêntricos, minutos e um grande marcador subtelocêntrico. Estas anomalias cariotípicas estão frequentemente associadas a células cancerígenas e contribuem para as caraterísticas únicas desta linha celular. As células A427 apresentam propriedades tumorigénicas, permitindo-lhes formar tumores quando injectadas em ratinhos nus.
Estes tumores assemelham-se a adenocarcinomas indiferenciados, o que reforça a importância desta linha celular no estudo do cancro do pulmão e da sua progressão. Com as suas caraterísticas excepcionais, as células A427 são úteis em várias aplicações, nomeadamente na investigação do cancro. A sua morfologia epitelial e a sua origem pulmonar fazem delas um modelo ideal para o estudo do cancro do pulmão e de doenças relacionadas. Além disso, as células A427 são adequadas para técnicas de cultura de células em 3D, proporcionando um ambiente fisiologicamente mais relevante para explorar o comportamento das células cancerígenas do pulmão.
- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma
- Sinónimos
- A-427
- A427N
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sim, em ratinhos nus. Forma um tumor indiferenciado sugestivo de adenocarcinoma.
- Cariótipo
- P60) hipotriplóide a hipertriplóide com anomalias incluindo dicêntricos, minutos e grande marcador subtelocêntrico
04Identificadores
- Referência
- A427 (número de catálogo Cytion 300111)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1055
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão proteica
- P53 positivo
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 1 x 104 células/cm² resultará numa monocamada confluente em 3 dias.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
- Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 4 x 104 células/cm2 e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 52 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
