İçeriğe atla
A427 Hücreleri
Doku
Akciğer
Hastalık
Karsinom
Eş anlamlılar
A-427, A427N

A427 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300111

A427 hücreleri akciğer dokusundan, daha spesifik olarak bir karsinomdan kaynaklanır, epitelyal morfoloji gösterir ve yapışarak büyür. A427 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

A427 hücreleri akciğer dokusundan, özellikle bir karsinomdan kaynaklanır, epitelyal morfoloji sergiler ve yapışık olarak büyür. A427 hücreleri %10 fetal sığır serumu (FBS) ile desteklenmiş RPMI 1640 ortamında yaklaşık 28 saatlik bir ikiye katlanma süresine sahiptir.

ACL-3 ortamında ikiye katlanma süresi biraz uzayarak 38 saate çıkarken, sığır serum albümini (BSA) ile desteklenen ACL-3'te 42 saate ulaşmaktadır. İki katına çıkma süresindeki bu değişimler, farklı deneysel koşullar altında hücre davranışına ilişkin değerli bilgiler sağlamaktadır.

60. pasajda, A427 hücreleri hipotriploid ila hipertriploid karyotip sergiler. Bu, hücrelerin dikentrikler, dakikalar ve büyük bir subtelosentrik işaretleyici dahil olmak üzere anormal kromozomlara sahip olduğu anlamına gelir. Bu tür karyotipik anormallikler genellikle kanser hücreleriyle ilişkilendirilir ve bu hücre hattının benzersiz özelliklerine katkıda bulunur. A427 hücreleri, çıplak farelere enjekte edildiklerinde tümör oluşturmalarını sağlayan tümörijenik özellikler sergiler.

Bu tümörler farklılaşmamış adenokarsinoma benzemekte ve bu hücre hattının akciğer kanseri ve ilerlemesini incelemedeki önemini daha da vurgulamaktadır. A427 hücreleri istisnai özellikleriyle başta kanser araştırmaları olmak üzere çeşitli uygulamalarda kullanım alanı bulmaktadır. Epitelyal morfolojileri ve akciğer kökenli olmaları, onları akciğer kanseri ve ilgili hastalıkların incelenmesi için ideal bir model haline getirmektedir. Ek olarak, A427 hücreleri 3D hücre kültürü teknikleri için çok uygundur ve akciğer kanseri hücrelerinin davranışını keşfetmek için fizyolojik olarak daha uygun bir ortam sağlar.

Doku
Akciğer
Hastalık
Karsinom
Eş anlamlılar
  • A-427
  • A427N

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde. Adenokarsinomu düşündüren farklılaşmamış bir tümör oluşturur.
Karyotip
P60) hipotriploid ila hipertriploid, dikentrikler, dakikalar ve büyük subtelosentrik işaretleyici dahil anormallikler

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A427 (Cytion katalog numarası 300111)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1055

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
P53 pozitif

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2, 3 gün içinde birleşik tek tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 4 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
52 yıl
Etnik köken
Kafkas