A427 Hücreleri
Cell line · Ürün numarası 300111
A427 hücreleri akciğer dokusundan, daha spesifik olarak bir karsinomdan kaynaklanır, epitelyal morfoloji gösterir ve yapışarak büyür. A427 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık...
Kişiselleştirme / Öneriler
- A427 HücreleriCell line€430.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
A427 hücreleri akciğer dokusundan, özellikle bir karsinomdan kaynaklanır, epitelyal morfoloji sergiler ve yapışık olarak büyür. A427 hücreleri %10 fetal sığır serumu (FBS) ile desteklenmiş RPMI 1640 ortamında yaklaşık 28 saatlik bir ikiye katlanma süresine sahiptir.
ACL-3 ortamında ikiye katlanma süresi biraz uzayarak 38 saate çıkarken, sığır serum albümini (BSA) ile desteklenen ACL-3'te 42 saate ulaşmaktadır. İki katına çıkma süresindeki bu değişimler, farklı deneysel koşullar altında hücre davranışına ilişkin değerli bilgiler sağlamaktadır.
60. pasajda, A427 hücreleri hipotriploid ila hipertriploid karyotip sergiler. Bu, hücrelerin dikentrikler, dakikalar ve büyük bir subtelosentrik işaretleyici dahil olmak üzere anormal kromozomlara sahip olduğu anlamına gelir. Bu tür karyotipik anormallikler genellikle kanser hücreleriyle ilişkilendirilir ve bu hücre hattının benzersiz özelliklerine katkıda bulunur. A427 hücreleri, çıplak farelere enjekte edildiklerinde tümör oluşturmalarını sağlayan tümörijenik özellikler sergiler.
Bu tümörler farklılaşmamış adenokarsinoma benzemekte ve bu hücre hattının akciğer kanseri ve ilerlemesini incelemedeki önemini daha da vurgulamaktadır. A427 hücreleri istisnai özellikleriyle başta kanser araştırmaları olmak üzere çeşitli uygulamalarda kullanım alanı bulmaktadır. Epitelyal morfolojileri ve akciğer kökenli olmaları, onları akciğer kanseri ve ilgili hastalıkların incelenmesi için ideal bir model haline getirmektedir. Ek olarak, A427 hücreleri 3D hücre kültürü teknikleri için çok uygundur ve akciğer kanseri hücrelerinin davranışını keşfetmek için fizyolojik olarak daha uygun bir ortam sağlar.
- Doku
- Akciğer
- Hastalık
- Karsinom
- Eş anlamlılar
- A-427
- A427N
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Erkek
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Epitel benzeri
- Tümör oluşturucu
- Evet, çıplak farelerde. Adenokarsinomu düşündüren farklılaşmamış bir tümör oluşturur.
- Karyotip
- P60) hipotriploid ila hipertriploid, dikentrikler, dakikalar ve büyük subtelosentrik işaretleyici dahil anormallikler
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- A427 (Cytion katalog numarası 300111)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1055
05İfade ve duyarlılık
- Protein ekspresyonu
- P53 pozitif
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Ekim yoğunluğu
- 1 x 104 hücre/cm2, 3 gün içinde birleşik tek tabaka oluşturacaktır.
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Çözüldükten sonra, hücreleri 4 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- 52 yıl
- Etnik köken
- Kafkas
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet
