Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα A427
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Συνώνυμα
A-427, A427N

Έγγραφα

Κύτταρα A427

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300111

Τα κύτταρα A427 προέρχονται από πνευμονικό ιστό, συγκεκριμένα από ένα καρκίνωμα, παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία και αναπτύσσονται προσκολλητικά. Τα κύτταρα A427 έχουν χρόνο διπλασιασμού περίπου...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα A427 προέρχονται από πνευμονικό ιστό, συγκεκριμένα από καρκίνωμα, παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία και αναπτύσσονται με προσκολλητικότητα. Τα κύτταρα A427 έχουν χρόνο διπλασιασμού περίπου 28 ώρες σε μέσο RPMI 1640 συμπληρωμένο με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS).

Σε μέσο ACL-3, ο χρόνος διπλασιασμού παρατείνεται ελαφρώς στις 38 ώρες, ενώ σε μέσο ACL-3 συμπληρωμένο με αλβουμίνη ορού βοοειδών (BSA), φτάνει τις 42 ώρες. Αυτές οι διακυμάνσεις του χρόνου διπλασιασμού παρέχουν πολύτιμες πληροφορίες για τη συμπεριφορά των κυττάρων υπό διαφορετικές πειραματικές συνθήκες.

Στο πέρασμα 60, τα κύτταρα A427 εμφανίζουν υποτριπλοειδή έως υπερτριπλοειδή καρυότυπο. Αυτό σημαίνει ότι τα κύτταρα διαθέτουν ανώμαλα χρωμοσώματα, συμπεριλαμβανομένων δικεντρικών, λεπτών και ενός μεγάλου υποτελοκεντρικού δείκτη. Τέτοιες καρυοτυπικές ανωμαλίες συνδέονται συχνά με καρκινικά κύτταρα και συμβάλλουν στα μοναδικά χαρακτηριστικά αυτής της κυτταρικής σειράς. Τα κύτταρα A427 παρουσιάζουν καρκινικές ιδιότητες, επιτρέποντάς τους να σχηματίζουν όγκους όταν εγχέονται σε γυμνά ποντίκια.

Οι όγκοι αυτοί μοιάζουν με αδιαφοροποίητο αδενοκαρκίνωμα, τονίζοντας περαιτέρω τη σημασία αυτής της κυτταρικής σειράς για τη μελέτη του καρκίνου του πνεύμονα και της εξέλιξής του. Με τα εξαιρετικά χαρακτηριστικά τους, τα κύτταρα A427 βρίσκουν χρησιμότητα σε διάφορες εφαρμογές, ιδίως στην έρευνα για τον καρκίνο. Η επιθηλιακή μορφολογία τους και η πνευμονική τους προέλευση τα καθιστούν ιδανικό μοντέλο για τη μελέτη του καρκίνου του πνεύμονα και των συναφών ασθενειών. Επιπλέον, τα κύτταρα A427 είναι κατάλληλα για τεχνικές τρισδιάστατης κυτταροκαλλιέργειας, παρέχοντας ένα πιο φυσιολογικά σχετικό περιβάλλον για τη διερεύνηση της συμπεριφοράς των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα.

Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Συνώνυμα
  • A-427
  • A427N

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια. Σχηματίζει αδιαφοροποίητο όγκο που υποδηλώνει αδενοκαρκίνωμα.
Καρυότυπος
P60) υποτριπλοειδής έως υπερτριπλοειδής με ανωμαλίες που περιλαμβάνουν δικεντρικά, λεπτά και μεγάλο υποτελοκεντρικό δείκτη

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
A427 (αριθμός καταλόγου Cytion 300111)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1055

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
P53 θετικό

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2 θα οδηγήσει σε συγχωνευμένη μονοστρωματική κυτταρική καλλιέργεια εντός 3 ημερών.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 4 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
52 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος