HTh-7

A linhagem celular HTh-7 é um modelo de carcinoma anaplásico da tireoide (ATC) humano, amplamente utilizado para estudar a natureza agressiva dessa neoplasia maligna. O ATC é caracterizado por rápida progressão, resistência às terapias convencionais e um prognóstico desfavorável. As células HTh-7 apresentam anomalias cromossômicas complexas típicas do ATC, incluindo ganhos e perdas específicas de regiões cromossômicas, como o cromossomo 20q, que estão associadas à progressão do câncer. Essas células não apresentam a mutação comum BRAF V600E, que é frequente no carcinoma papilar da tireoide, mas menos comum no ATC, destacando a diversidade de fatores oncogênicos em diferentes tipos de câncer de tireoide.

Uma caracterização genômica mais aprofundada da linhagem celular HTh-7 revela mutações frequentes no promotor do TERT, uma característica marcante dos cânceres de tireoide agressivos. As células apresentam uma deleção na cópia do TERT do tipo selvagem, sugerindo a presença de uma mutação homozigótica no promotor do TERT, o que provavelmente contribui para seu fenótipo agressivo ao promover a ativação da telomerase. As células HTh-7 também apresentam mutações no gene TP53, levando à perda completa da função do p53, um evento comum no ATC e um fator causador de instabilidade genômica. Essa perda de função costuma estar associada a outras mutações, como no PTEN e em genes envolvidos na via PI3K/AKT/mTOR, o que ressalta ainda mais a utilidade da HTh-7 como modelo para o estudo dos fundamentos moleculares do ATC.

As células HTh-7 também apresentam dediferenciação significativa, conforme evidenciado pelos baixos índices de diferenciação tireoidiana (TDS), semelhantes aos observados em tumores de ATC. Essa desdiferenciação é característica de cânceres de tireoide em estágio avançado e se reflete na profunda perda da expressão gênica específica da tireoide, tornando a HTh-7 um modelo ideal para investigar os mecanismos de desdiferenciação do câncer de tireoide e os desafios terapêuticos associados. O perfil genético da linhagem celular, incluindo suas alterações nos genes TP53 e TERT, destaca sua relevância para estudos pré-clínicos que visam explorar novas abordagens terapêuticas para o ATC, particularmente aquelas direcionadas a vias envolvidas na manutenção dos telômeros e mecanismos relacionados ao p53.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.