Siirry sisältöön
HTh-7
Kudos
Kilpirauhanen
Sairaus
Kilpirauhasen anaplastinen karsinooma
Synonyymit
Hth7, HTh 7, HTh-7, Uhth-7, U-hth7, U-Hth7

Asiakirjat

HTh-7

Cell line · Tuotenumero 305128

HTh-7-solulinja on ihmisen anaplastisen kilpirauhassyövän (ATC) malli, jota käytetään laajalti tämän pahanlaatuisen kasvaimen aggressiivisuuden tutkimiseen. ATC:lle on ominaista...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HTh-7-solulinja on ihmisen anaplastisen kilpirauhassyövän (ATC) malli, jota käytetään laajalti tämän pahanlaatuisen kasvaimen aggressiivisuuden tutkimiseen. ATC:lle on ominaista nopea eteneminen, vastustuskyky tavanomaisille hoitomuodoille ja huono ennuste. HTh-7-soluissa esiintyy ATC:lle tyypillisiä monimutkaisia kromosomipoikkeavuuksia, mukaan lukien tiettyjen kromosomialueiden, kuten kromosomin 20q, spesifiset lisäykset ja menetykset, jotka liittyvät syövän etenemiseen. Näissä soluissa ei esiinny yleistä BRAF V600E -mutaatioita, joka on yleinen papillaarisessa kilpirauhassyövässä mutta harvinaisempi ATC:ssä, mikä korostaa eri kilpirauhassyöpien syöpää aiheuttavien tekijöiden monimuotoisuutta.

HTh-7-solulinjan genomin tarkempi karakterisointi paljastaa usein esiintyviä mutaatioita TERT-promoottorissa, mikä on aggressiivisten kilpirauhassyöpien tunnusmerkki. Soluissa esiintyy deleetio villityypin TERT-kopiossa, mikä viittaa homotsygoottisen TERT-promoottorimutaation läsnäoloon, joka todennäköisesti edistää niiden aggressiivista fenotyyppiä edistämällä telomeraasin aktivaatiota. HTh-7-soluissa on myös mutaatioita TP53-geenissä, mikä johtaa p53-funktion täydelliseen menetykseen, mikä on yleistä ATC:ssä ja genomin epävakauden aiheuttaja. Tämä funktion menetys liittyy usein muihin mutaatioihin, kuten PTEN-geenissä ja PI3K/AKT/mTOR-reitin geeneissä, mikä korostaa entisestään HTh-7:n hyödyllisyyttä mallina ATC:n molekyylitason mekanismien tutkimuksessa.

HTh-7-solut osoittavat myös merkittävää dedifferentoitumista, mikä näkyy alhaisina kilpirauhasen erilaistumispisteinä (TDS), jotka ovat samanlaisia kuin ATC-kasvaimissa. Tämä dedifferentoituminen on tyypillistä pitkälle edenneille kilpirauhassyöville ja näkyy kilpirauhaskohtaisen geeniekspression merkittävänä menetyksenä, mikä tekee HTh-7:stä ihanteellisen mallin kilpirauhassyövän dedifferentoitumisen mekanismien ja siihen liittyvien terapeuttisten haasteiden tutkimiseen. Solulinjan geneettinen profiili, mukaan lukien muutokset TP53- ja TERT-geeneissä, korostaa sen merkitystä prekliinisissä tutkimuksissa, joiden tavoitteena on tutkia uusia terapeuttisia lähestymistapoja ATC:n hoitoon, erityisesti niitä, jotka kohdistuvat telomeerien ylläpitoon ja p53-mekanismeihin.

Kudos
Kilpirauhanen
Sairaus
Kilpirauhasen anaplastinen karsinooma
Synonyymit
  • Hth7
  • HTh 7
  • HTh-7
  • Uhth-7
  • U-hth7
  • U-Hth7

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
HTh-7 (Cytionin tuotenumero 305128)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_6289

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
74 vuotta