Pāriet uz saturu
HTh-7
Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Sinonīmi
Hth7, HTh 7, HTh-7, Uhth-7, U-hth7, U-Hth7

Dokumenti

HTh-7

Cell line · Preces numurs 305128

HTh-7 šūnu līnija ir cilvēka anaplastiskā vairogdziedzera karcinomas (ATC) modelis, ko plaši izmanto, lai pētītu šī ļaundabīgā audzēja agresīvo raksturu. ATC raksturīga...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HTh-7 šūnu līnija ir cilvēka anaplastiskā vairogdziedzera karcinoma (ATC) modelis, ko plaši izmanto, lai pētītu šī ļaundabīgā audzēja agresīvo raksturu. ATC raksturīga strauja progresēšana, rezistence pret tradicionālajām terapijām un nelabvēlīga prognoze. HTh-7 šūnas uzrāda sarežģītas hromosomu anomālijas, kas ir tipiskas ATC, tostarp specifiskus hromosomu reģionu, piemēram, hromosomas 20q, pieaugumus un zudumus, kas ir saistīti ar vēža progresēšanu. Šīs šūnas nesatur izplatīto BRAF V600E mutāciju, kas bieži sastopama papilārajā vairogdziedzera karcinomā, bet retāk ATC, kas uzsver onkogēno faktoru daudzveidību dažādos vairogdziedzera vēža veidos.

HTh-7 šūnu līnijas turpmāka genomiskā raksturošana atklāj biežas mutācijas TERT promotorā, kas ir agresīvu vairogdziedzera vēžu pazīme. Šūnas uzrāda deleciju savvaļas tipa TERT kopijā, liecinot par homozigotas TERT promotora mutācijas klātbūtni, kas, visticamāk, veicina to agresīvo fenotipu, sekmējot telomerāzes aktivāciju. HTh-7 šūnas nes arī mutācijas TP53 gēnā, kas izraisa p53 funkcijas pilnīgu zudumu — bieži sastopamu parādību ATC un genomiskās nestabilitātes cēloni. Šis funkcijas zudums bieži ir saistīts ar citām mutācijām, piemēram, PTEN un gēnos, kas iesaistīti PI3K/AKT/mTOR ceļā, vēl vairāk uzsverot HTh-7 lietderību kā modeli ATC molekulāro pamatu izpētei.

HTh-7 šūnas demonstrē arī ievērojamu dediferentāciju, ko apliecina zems vairogdziedzera diferenciācijas rādītājs (TDS), kas ir līdzīgs ATC audzējiem. Šī dediferentācija ir raksturīga progresējušiem vairogdziedzera vēžiem un atspoguļojas vairogdziedzera specifisko gēnu ekspresijas ievērojamā zudumā, padarot HTh-7 par ideālu modeli vairogdziedzera vēža dediferentācijas mehānismu un ar to saistīto terapeitisko izaicinājumu izpētei. Šīs šūnu līnijas ģenētiskais profils, ieskaitot izmaiņas TP53 un TERT gēnos, uzsver tās nozīmi pirmsklīniskajos pētījumos, kuru mērķis ir izpētīt jaunus ATC ārstēšanas pieejas, jo īpaši tās, kas vērstas uz telomēru uzturēšanā iesaistītajiem ceļiem un ar p53 saistītajiem mehānismiem.

Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Sinonīmi
  • Hth7
  • HTh 7
  • HTh-7
  • Uhth-7
  • U-hth7
  • U-Hth7

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
HTh-7 (Cytion kataloga numurs 305128)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_6289

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
74 gadi