Přejít na obsah
HTh-7
Tkáň
Štítná žláza
Nemoc
Anaplastický karcinom štítné žlázy
Synonyma
Hth7, HTh 7, HTh-7, Uhth-7, U-hth7, U-Hth7

Dokumenty

HTh-7

Cell line · Číslo výrobku 305128

Buněčná linie HTh-7 představuje model lidského anaplastického karcinomu štítné žlázy (ATC) a je široce využívána ke studiu agresivní povahy tohoto zhoubného nádoru. ATC se vyznačuje...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HTh-7 představuje model lidského anaplastického karcinomu štítné žlázy (ATC) a je široce využívána ke studiu agresivní povahy tohoto zhoubného nádoru. ATC se vyznačuje rychlým průběhem, rezistencí vůči konvenčním terapiím a špatnou prognózou. Buňky HTh-7 vykazují komplexní chromozomální abnormality typické pro ATC, včetně specifických zisků a ztrát chromozomálních oblastí, jako je chromozom 20q, které jsou spojeny s progresí rakoviny. Tyto buňky neobsahují běžnou mutaci BRAF V600E, která se často vyskytuje u papilárního karcinomu štítné žlázy, ale méně u ATC, což zdůrazňuje rozmanitost onkogenních faktorů u různých typů rakoviny štítné žlázy.

Další genomická charakteristika buněčné linie HTh-7 odhaluje časté mutace v promotoru TERT, což je charakteristický znak agresivních karcinomů štítné žlázy. Buňky vykazují deleci v kopii TERT divokého typu, což naznačuje přítomnost homozygotní mutace promotoru TERT, která pravděpodobně přispívá k jejich agresivnímu fenotypu tím, že podporuje aktivaci telomerázy. Buňky HTh-7 také nesou mutace v genu TP53, což vede k úplné ztrátě funkce p53, což je běžný jev u ATC a faktor genomové nestability. Tato ztráta funkce je často spojena s dalšími mutacemi, například v PTEN a genech zapojených do signální dráhy PI3K/AKT/mTOR, což dále podtrhuje užitečnost HTh-7 jako modelu pro studium molekulárních základů ATC.

Buňky HTh-7 také vykazují významnou dediferenciaci, o čemž svědčí nízké skóre diferenciace štítné žlázy (TDS), podobné tomu u nádorů ATC. Tato dediferenciace je charakteristická pro pokročilé karcinomy štítné žlázy a odráží se v hluboké ztrátě exprese genů specifických pro štítnou žlázu, což činí z HTh-7 ideální model pro zkoumání mechanismů dediferenciace karcinomu štítné žlázy a souvisejících terapeutických výzev. Genetický profil této buněčné linie, včetně jejích alterací v genech TP53 a TERT, podtrhuje její význam pro preklinické studie zaměřené na zkoumání nových terapeutických přístupů k ATC, zejména těch, které se zaměřují na signální dráhy podílející se na udržování telomer a mechanismy související s p53.

Tkáň
Štítná žláza
Nemoc
Anaplastický karcinom štítné žlázy
Synonyma
  • Hth7
  • HTh 7
  • HTh-7
  • Uhth-7
  • U-hth7
  • U-Hth7

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
HTh-7 (katalogové číslo Cytion 305128)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6289

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
74 let