Preskoči na vsebino
HTh-7
Tkivo
Ščitnica
Bolezen
Anaplastični karcinom ščitnice
Sinonimi
Hth7, HTh 7, HTh-7, Uhth-7, U-hth7, U-Hth7

Dokumenti

HTh-7

Cell line · Številka izdelka 305128

Celična linija HTh-7 je model človeškega anaplastičnega karcinoma ščitnice (ATC), ki se pogosto uporablja za preučevanje agresivnosti tega malignega obolenja. ATC je značilen...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HTh-7 je model človeškega anaplastičnega karcinoma ščitnice (ATC), ki se pogosto uporablja za preučevanje agresivnosti tega malignega obolenja. ATC je značilen po hitrem napredovanju, odpornosti na konvencionalna zdravljenja in slabi prognozi. Celice HTh-7 kažejo kompleksne kromosomske anomalije, značilne za ATC, vključno s specifičnimi pridobitvami in izgubami kromosomskih regij, kot je kromosom 20q, ki so povezane s progresijo raka. Te celice ne vsebujejo pogoste mutacije BRAF V600E, ki je pogosta pri papilarnem karcinomu ščitnice, manj pa pri ATC, kar poudarja raznolikost onkogenih dejavnikov pri različnih vrstah raka ščitnice.

Nadaljnja genomna karakterizacija celične linije HTh-7 razkriva pogoste mutacije v promotorju TERT, kar je značilnost agresivnih rakov ščitnice. Celice kažejo delecijo v kopiji TERT divjega tipa, kar kaže na prisotnost homozigotne mutacije promotorja TERT, ki verjetno prispeva k njihovemu agresivnemu fenotipu s spodbujanjem aktivacije telomeraze. Celice HTh-7 nosijo tudi mutacije v genu TP53, kar vodi do popolne izgube funkcije p53, kar je pogost pojav pri ATC in dejavnik genomne nestabilnosti. Ta izguba funkcije je pogosto povezana z drugimi mutacijami, kot so mutacije v PTEN in genih, vključenih v pot PI3K/AKT/mTOR, kar dodatno poudarja uporabnost HTh-7 kot modela za preučevanje molekularnih temeljev ATC.

Celice HTh-7 kažejo tudi znatno dediferenciacijo, kar dokazujejo nizke ocene diferenciacije ščitnice (TDS), podobne tistim pri tumorjih ATC. Ta dediferenciacija je značilna za napredne rake ščitnice in se odraža v izraziti izgubi ekspresije genov, specifičnih za ščitnico, kar naredi HTh-7 idealen model za preučevanje mehanizmov dediferenciacije raka ščitnice in s tem povezanih terapevtskih izzivov. Genetski profil celične linije, vključno s spremembami v genih TP53 in TERT, poudarja njeno pomembnost za predklinične študije, katerih cilj je raziskovanje novih terapevtskih pristopov za ATC, zlasti tistih, ki so usmerjeni v poti, vključene v vzdrževanje telomerov, in mehanizme, povezane s p53.

Tkivo
Ščitnica
Bolezen
Anaplastični karcinom ščitnice
Sinonimi
  • Hth7
  • HTh 7
  • HTh-7
  • Uhth-7
  • U-hth7
  • U-Hth7

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
HTh-7 (kataloška številka Cytion 305128)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6289

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
74 let