الانتقال إلى المحتوى
HROG33 T0 M1
الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

المستندات

HROG33 T0 M1

Cell line · رقم المنتج 300878

HROG33 T0 M1 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult female patient with WHO...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
مخزون منخفض
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

HROG33 T0 M1 هو خط خلايا أولي لورم أرومي دبقي متعدد الأشكال (GBM) بشري تم إنشاؤه من نسيج ورم تم استئصاله حديثًا من مريضة بالغة مصابة بورم أرومي دبقي من الدرجة الرابعة حسب تصنيف منظمة الصحة العالمية (WHO) يقع في المنطقة القذالية الصدغية اليسرى. يشير التسمية "T0" إلى الورم الأولي عند التشخيص الأولي، بينما يشير "M1" إلى النموذج المختبري المقابل المستمد من هذه العينة. تم إنشاء خط الخلايا كجزء من جهد منهجي لإنشاء مزارع GBM ذات تمريرات منخفضة للغاية من مواد ورمية طازجة ومحفوظة بالتبريد، بهدف الحفاظ على الخصائص الجزيئية والوظيفية الخاصة بالمريض.

يُظهر HROG33 T0 M1 نموًا ملتصقًا مع شكل خلايا ليفية نموذجي لثقافات GBM الأولية. تشكل الخلايا طبقة أحادية وتُظهر قدرة تكاثرية متسقة في المختبر. في الدراسة المقارنة، لم تظهر الثقافات المقترنة المستمدة من أنسجة الأورام الطازجة والمحفوظة بالتبريد أي اختلافات كبيرة في الشكل أو حركية النمو أو الاستجابة للأدوية. أظهرت الخصائص المناعية لخطوط الخلايا HROG التمثيلية التعبير عن علامات مرتبطة بالسلالة العصبية بما في ذلك البروتين الحمضي الليفي الدبقي (GFAP) ونيستين وفيمنتين، بما يتوافق مع النمط الظاهري المشتق من الورم الدبقي. تضمنت التحليلات الجزيئية التي أجريت على سلسلة HROG تقييم مثيلة MGMT، وتضخيم EGFR، وحالة طفرات TP53 و IDH1/2 و KRAS و BRAF، مما يدعم الاحتفاظ بالسمات الجينومية الخاصة بالورم في المزارع المعمول بها.

من الناحية الوظيفية، تم تقييم سلالات الخلايا المشتقة من HROG من حيث حساسيتها للعلاج القياسي والعوامل التجريبية المستخدمة في علاج GBM، بما في ذلك تيموزولوميد و BCNU (كارموستين) وفينكريستين وإيماتينيب. أشارت ملامح استجابة الأدوية لأزواج سلالات الخلايا المتطابقة إلى سلوك دوائي مستقر وقابل للتكرار بعد حفظ الأنسجة بالتبريد. كنموذج GBM أولي منخفض التمرير للغاية، يوفر HROG33 T0 M1 نظامًا مختبريًا ذا صلة سريرية لدراسة بيولوجيا الورم الأرومي الدبقي، والتنبؤ بالاستجابة العلاجية، وتباين الأورام الخاصة بكل مريض، مع تقليل التشوهات المرتبطة بالتكيف المستمر طويل الأمد لخطوط الخلايا.

الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
HROG33 T0 M1 (كتالوج سيتيون رقم 300878)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_4U48

04التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

06المانح

عمر المتبرع
46 سنة
الأصل العرقي
قوقازي