HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 je primární lidská buněčná linie glioblastoma multiforme (GBM) vytvořená z čerstvě resekované nádorové tkáně dospělé pacientky s glioblastomem stupně IV podle klasifikace WHO lokalizovaným v levé okcipitotemporální oblasti. Označení „T0“ odkazuje na primární nádor při počáteční diagnóze a „M1“ označuje odpovídající in vitro model odvozený z tohoto vzorku. Buněčná linie byla vytvořena v rámci systematického úsilí o vytvoření kultur GBM s extrémně nízkým počtem pasáží z čerstvého i vitálně kryokonzervovaného nádorového materiálu s cílem zachovat molekulární a funkční charakteristiky specifické pro daného pacienta.

HROG33 T0 M1 vykazuje adhezivní růst s morfologií podobnou fibroblastům, která je typická pro primární kultury GBM. Buňky tvoří monovrstvu a vykazují konzistentní proliferační schopnost in vitro. Ve srovnávací studii párových kultur odvozených z čerstvé a kryokonzervované nádorové tkáně nebyly zaznamenány žádné významné rozdíly v morfologii, kinetice růstu nebo reakci na léky. Imunofenotypová charakterizace reprezentativních buněčných linií HROG prokázala expresi markerů spojených s nervovou linií, včetně glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestinu a vimentinu, což je v souladu s fenotypem odvozeným od gliomu. Molekulární analýzy provedené v celé sérii HROG zahrnovaly hodnocení metylace promotoru MGMT, amplifikace EGFR a mutačního stavu TP53, IDH1/2, KRAS a BRAF, což podporuje zachování nádorově specifických genomických rysů v ustavených kulturách.

Funkčně byly buněčné linie odvozené od HROG hodnoceny z hlediska citlivosti na standardní léčbu a experimentální látky používané v terapii GBM, včetně temozolomidu, BCNU (karmustinu), vinkristinu a imatinibu. Profily reakce na léky u párových buněčných linií vykazovaly stabilní a reprodukovatelné farmakologické chování po kryokonzervaci tkání. Jako primární model GBM s extrémně nízkým počtem pasáží poskytuje HROG33 T0 M1 klinicky relevantní in vitro systém pro výzkum biologie glioblastomu, predikci terapeutické odezvy a heterogenity nádoru specifické pro daného pacienta, přičemž minimalizuje artefakty spojené s dlouhodobou nepřetržitou adaptací buněčné linie.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení