HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 je primarna človeška glioblastoma multiforme (GBM) celična linija, vzpostavljena iz sveže odstranjenega tumorja odrasle ženske pacientke z glioblastomom stopnje IV po klasifikaciji WHO, ki se nahaja v levi okcipitotemporalni regiji. Oznaka „T0“ se nanaša na primarni tumor ob prvotni diagnozi, „M1“ pa označuje ustrezen in vitro model, pridobljen iz tega vzorca. Celična linija je bila ustvarjena v okviru sistematičnih prizadevanj za vzpostavitev kultur GBM z izredno nizkim številom prehodov iz svežega in vitalno kriokonzerviranega tumorja, s ciljem ohraniti molekularne in funkcionalne značilnosti, specifične za posameznega pacienta.

HROG33 T0 M1 kaže adhezivno rast z morfologijo, podobno fibroblastom, ki je značilna za primarne kulture GBM. Celice tvorijo monosloj in kažejo dosledno proliferativno sposobnost in vitro. V primerjalni študiji vzpostavitve pari kultur, pridobljenih iz svežega in kriokonzerviranega tumorja, niso pokazali pomembnih razlik v morfologiji, kinetičnem rasti ali odzivnosti na zdravila. Imunofenotipska karakterizacija reprezentativnih celičnih linij HROG je pokazala izražanje markerjev, povezanih z nevralno linijo, vključno z glialnim fibrilarnim kislim proteinom (GFAP), nestinom in vimentinom, kar je skladno s fenotipom, pridobljenim iz glioma. Molekularne analize, izvedene v seriji HROG, so vključevale oceno metilacije promotorja MGMT, amplifikacije EGFR in mutacijskega statusa TP53, IDH1/2, KRAS in BRAF, kar podpira ohranitev tumorsko specifičnih genomskih značilnosti v vzpostavljenih kulturah.

Funkcionalno so bile celične linije, pridobljene iz HROG, ocenjene glede občutljivosti na standardna in raziskovalna zdravila, ki se uporabljajo v terapiji GBM, vključno s temozolomidom, BCNU (karmustinom), vinkristinom in imatinibom. Profili odziva na zdravila pri ujemajočih se parih celičnih linij so pokazali stabilno in reproduktibilno farmakološko vedenje po krioprezervaciji tkiva. Kot primarni model GBM z izredno nizkim številom prehodov HROG33 T0 M1 zagotavlja klinično relevanten in vitro sistem za preučevanje biologije glioblastoma, napovedovanje terapevtskega odziva in heterogenosti tumorja, specifične za posameznega pacienta, hkrati pa zmanjšuje artefakte, povezane z dolgotrajno neprekinjeno prilagajanje celične linije.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo