HROG33 T0 M1

Το HROG33 T0 M1 είναι μια πρωτογενής κυτταρική σειρά πολυμορφικού γλοιοβλαστώματος (GBM) ανθρώπου που δημιουργήθηκε από πρόσφατα εκτομωμένο ιστό όγκου μιας ενήλικης γυναίκας με γλοιοβλάστωμα βαθμού IV κατά WHO, το οποίο εντοπίστηκε στην αριστερή ινιακή-κροταφική περιοχή. Ο χαρακτηρισμός «T0» αναφέρεται στον πρωτοπαθή όγκο κατά την αρχική διάγνωση, ενώ «M1» υποδηλώνει το αντίστοιχο in vitro μοντέλο που προέρχεται από αυτό το δείγμα. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε στο πλαίσιο μιας συστηματικής προσπάθειας για τη δημιουργία καλλιεργειών GBM εξαιρετικά χαμηλού περάσματος από φρέσκο και ζωτικά κρυοσυντηρημένο υλικό όγκου, με στόχο τη διατήρηση των μοριακών και λειτουργικών χαρακτηριστικών του συγκεκριμένου ασθενούς.

Το HROG33 T0 M1 εμφανίζει προσκολλητική ανάπτυξη με μορφολογία τύπου ινοβλαστών, χαρακτηριστική των πρωτογενών καλλιεργειών GBM. Τα κύτταρα σχηματίζουν μονοστρωματικό στρώμα και εμφανίζουν σταθερή πολλαπλασιαστική ικανότητα in vitro. Στη συγκριτική μελέτη καθιέρωσης, οι ζευγαρωμένες καλλιέργειες που προέρχονταν από φρέσκο και κρυοσυντηρημένο όγκο δεν παρουσίασαν σημαντικές διαφορές στη μορφολογία, την κινητική ανάπτυξης ή την ανταπόκριση στα φάρμακα. Ο ανοσοφαινοτυπικός χαρακτηρισμός των αντιπροσωπευτικών κυτταρικών σειρών HROG έδειξε έκφραση δεικτών που σχετίζονται με τη νευρική καταγωγή, συμπεριλαμβανομένων της γλοιακής ινώδους όξινης πρωτεΐνης (GFAP), της νεστίνης και της βιμεντίνης, σύμφωνα με έναν φαινότυπο που προέρχεται από γλοίωμα. Οι μοριακές αναλύσεις που πραγματοποιήθηκαν σε όλη τη σειρά HROG περιελάμβαναν την αξιολόγηση της μεθυλίωσης του προαγωγού MGMT, της ενίσχυσης του EGFR και της μεταλλακτικής κατάστασης των TP53, IDH1/2, KRAS και BRAF, υποστηρίζοντας τη διατήρηση των γονιδιωματικών χαρακτηριστικών που είναι ειδικά για τον όγκο σε καθιερωμένες καλλιέργειες.

Λειτουργικά, οι κυτταρικές σειρές που προέρχονται από HROG έχουν αξιολογηθεί ως προς την ευαισθησία τους σε φάρμακα που χρησιμοποιούνται ως πρότυπη θεραπεία και σε ερευνητικά φάρμακα που χρησιμοποιούνται στη θεραπεία του GBM, συμπεριλαμβανομένων των τεμοζολομίδης, BCNU (καρμουστίνη), βινκριστίνης και ιματινίμπης. Τα προφίλ ανταπόκρισης στα φάρμακα των ζευγών κυτταρικών σειρών που αντιστοιχούν μεταξύ τους έδειξαν σταθερή και αναπαραγώγιμη φαρμακολογική συμπεριφορά μετά την κρυοσυντήρηση των ιστών. Ως μοντέλο πρωτογενούς GBM εξαιρετικά χαμηλής διέλευσης, το HROG33 T0 M1 παρέχει ένα κλινικά σχετικό in vitro σύστημα για τη διερεύνηση της βιολογίας του γλοιοβλαστώματος, την πρόβλεψη της θεραπευτικής απόκρισης και την ετερογένεια του όγκου σε κάθε ασθενή, ελαχιστοποιώντας παράλληλα τα τεχνητά φαινόμενα που σχετίζονται με τη μακροχρόνια συνεχή προσαρμογή της κυτταρικής σειράς.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης