HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 on primaarinen ihmisen glioblastoma multiforme (GBM) -solulinja, joka on perustettu vastaleikatusta kasvainkudoksesta, joka on peräisin aikuisten naispotilaiden WHO-luokan IV glioblastomasta, joka sijaitsee vasemmassa takaraivo-ohimialueella. Merkintä ”T0” viittaa primaariseen kasvaimeen alkuperäisessä diagnoosissa, ja ”M1” viittaa vastaavaan in vitro -malliin, joka on johdettu tästä näytteestä. Solulinja on luotu osana systemaattista pyrkimystä luoda erittäin vähän passitoituja GBM-viljelmiä sekä tuoreesta että elinvoimaisesta kryosäilötyistä kasvainmateriaaleista, tavoitteena säilyttää potilaskohtaiset molekyyliset ja toiminnalliset ominaisuudet.

HROG33 T0 M1 osoittaa adheesiivista kasvua, jolla on primaarisille GBM-viljelmille tyypillinen fibroblastien kaltainen morfologia. Solut muodostavat yksikerroksisen kerroksen ja osoittavat in vitro tasaisen proliferaatiokyvyn. Vertailevassa perustamistutkimuksessa tuoreesta ja kryosäilötyistä kasvainkudoksista johdetuissa parikulttuureissa ei havaittu merkittäviä eroja morfologiassa, kasvukineetiikassa tai lääkevasteessa. Edustavien HROG-solulinjojen immunofenotyyppinen karakterisointi osoitti gliafibrillaarisen happaman proteiinin (GFAP), nestinin ja vimentiinin kaltaisten hermosolulinjaan liittyvien merkkiaineiden ilmentymisen, mikä on yhdenmukaista glioomasta johdetun fenotyypin kanssa. HROG-sarjassa suoritetut molekyylianalyysit sisälsivät MGMT-promoottorin metylaation, EGFR-amplifikaation ja TP53-, IDH1/2-, KRAS- ja BRAF-mutaatioiden arvioinnin, mikä tukee kasvaimille ominaisia genomisia piirteitä vakiintuneissa viljelmissä.

Toiminnallisesti HROG-peräiset solulinjat on arvioitu herkkyydeltään GBM-hoidossa käytetyille standardihoidoille ja tutkimusaineille, mukaan lukien temotsolomidi, BCNU (karmustiini), vinkristiini ja imatinibi. Vastaavien solulinjaparien lääkevasteprofiilit osoittivat stabiilia ja toistettavaa farmakologista käyttäytymistä kudoksen kryosäilytyksen jälkeen. Erittäin matalan passageluvun primaarisena GBM-mallina HROG33 T0 M1 tarjoaa kliinisesti merkityksellisen in vitro -järjestelmän glioblastooman biologian, terapeuttisen vasteen ennustamisen ja potilaskohtaisen kasvaimen heterogeenisyyden tutkimiseen samalla minimoiden pitkäaikaiseen jatkuvaan solulinjan sopeutumiseen liittyvät artefaktit.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa