Langsung ke isi
HROG33 T0 M1
Tisu
Otak
Penyakit
Glioblastoma

HROG33 T0 M1

Cell line · Nomor produk 300878

HROG33 T0 M1 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult female patient with WHO...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Stok menipis
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi

HROG33 T0 M1 adalah garis sel glioblastoma multiforme (GBM) manusia primer yang didirikan dari jaringan tumor yang baru diangkat dari pasien wanita dewasa dengan glioblastoma grade IV WHO yang terletak di daerah occipitotemporal kiri. Penunjukan “T0” merujuk pada tumor primer pada diagnosis awal, sedangkan “M1” menandakan model in vitro yang dihasilkan dari spesimen tersebut. Garis sel ini dihasilkan sebagai bagian dari upaya sistematis untuk mengembangkan kultur GBM dengan jumlah passage ultra-rendah dari bahan tumor segar dan yang dibekukan secara vital, dengan tujuan mempertahankan karakteristik molekuler dan fungsional yang spesifik pasien.

HROG33 T0 M1 menunjukkan pertumbuhan adheren dengan morfologi fibroblastik yang khas pada kultur GBM primer. Sel membentuk monolayer dan menunjukkan kapasitas proliferatif yang konsisten in vitro. Dalam studi pembentukan perbandingan, kultur yang dihasilkan dari jaringan tumor segar dan yang dibekukan secara kriogenik tidak menunjukkan perbedaan signifikan dalam morfologi, kinetika pertumbuhan, atau respons terhadap obat. Karakterisasi imunofenotipik garis sel HROG yang representatif menunjukkan ekspresi penanda garis sel saraf, termasuk protein asam fibrilar glial (GFAP), nestin, dan vimentin, yang konsisten dengan fenotip yang berasal dari glioma. Analisis molekuler yang dilakukan pada seri HROG mencakup penilaian metilasi promotor MGMT, amplifikasi EGFR, dan status mutasi TP53, IDH1/2, KRAS, dan BRAF, mendukung retensi fitur genomik spesifik tumor pada kultur yang telah didirikan.

Secara fungsional, garis sel yang berasal dari HROG telah dievaluasi untuk sensitivitas terhadap agen standar perawatan dan agen investigasional yang digunakan dalam terapi GBM, termasuk temozolomide, BCNU (carmustine), vincristine, dan imatinib. Profil respons obat dari pasangan garis sel yang cocok menunjukkan perilaku farmakologis yang stabil dan dapat diulang setelah kriopreservasi jaringan. Sebagai model GBM primer dengan jumlah passage ultra-rendah, HROG33 T0 M1 menyediakan sistem in vitro yang relevan secara klinis untuk menyelidiki biologi glioblastoma, prediksi respons terapeutik, dan heterogenitas tumor spesifik pasien, sambil meminimalkan artefak yang terkait dengan adaptasi sel yang berkelanjutan dalam jangka panjang.

Tisu
Otak
Penyakit
Glioblastoma

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Pengidentifikasi

Referensi
HROG33 T0 M1 (Nomor katalog Cytion 300878)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4U48

04Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan 50% media basal + 40% FBS + 10% DMSO, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

06Donatur

Usia donor
46 tahun
Etnis
Kaukasia