HROG33 T0 M1

A HROG33 T0 M1 egy elsődleges humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy felnőtt női beteg bal occipitotemporalis régiójában található, WHO IV. fokozatú glioblastomából frissen eltávolított tumor szövetből hoztak létre. A „T0” jelölés az elsődleges tumorra utal a kezdeti diagnózisban, az „M1” pedig a mintából származó megfelelő in vitro modellt jelöli. A sejtvonalat egy szisztematikus erőfeszítés részeként hozták létre, amelynek célja ultra-alacsony passzálású GBM-tenyészetek létrehozása volt friss és vitálisan kriokonzervált tumor anyagokból, a betegspecifikus molekuláris és funkcionális jellemzők megőrzése érdekében.

A HROG33 T0 M1 adhezív növekedést mutat, elsődleges GBM-tenyészetekre jellemző fibroblaszt-szerű morfológiával. A sejtek egyrétegűek és in vitro konzisztens proliferációs képességgel rendelkeznek. Az összehasonlító létrehozási tanulmányban a friss és kriokonzervált tumor szövetből származó párosított kultúrák nem mutattak szignifikáns különbségeket a morfológiában, a növekedési kinetikában vagy a gyógyszerre adott reakcióban. A reprezentatív HROG sejtvonalak immunfenotípusos jellemzése kimutatta a neurális vonalhoz kapcsolódó markerek, köztük a glia fibrilláris savas fehérje (GFAP), a nestin és a vimentin expresszióját, ami összhangban van a gliómából származó fenotípussal. A HROG-sorozaton végzett molekuláris elemzések magukban foglalták az MGMT promóter metilációjának, az EGFR amplifikációjának, valamint a TP53, IDH1/2, KRAS és BRAF mutációs státuszának értékelését, alátámasztva a tumor-specifikus genomikus jellemzők megőrződését a létrehozott tenyészetekben.

Funkcionálisan a HROG-ból származó sejtvonalakat értékelték a GBM-terápiában alkalmazott standard kezelési és kísérleti szerekkel szembeni érzékenységükre, beleértve a temozolomidot, a BCNU-t (karmustin), a vinkrisztint és az imatinibot. Az egymáshoz illő sejtvonalpárok gyógyszerre adott válaszprofiljai stabil és reprodukálható farmakológiai viselkedést mutattak a szövetek krioprezervációja után. Ultra-alacsony passzálású primer GBM modellként a HROG33 T0 M1 klinikailag releváns in vitro rendszert biztosít a glioblastoma biológiájának, a terápiás válasz előrejelzésének és a betegspecifikus tumorheterogenitásnak a vizsgálatához, miközben minimalizálja a hosszú távú folyamatos sejtvonal-adaptációval kapcsolatos artefaktumokat.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban