HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 je primárna ľudská bunková línia glioblastoma multiforme (GBM) vytvorená z čerstvo odstráneného nádorového tkaniva dospelá pacientky s glioblastómom stupňa IV podľa WHO lokalizovaným v ľavej okcipitotemporálnej oblasti. Označenie „T0“ sa vzťahuje na primárny nádor pri počiatočnej diagnóze a „M1“ označuje zodpovedajúci in vitro model odvodený z tejto vzorky. Bunková línia bola vytvorená v rámci systematického úsilia o vytvorenie kultúr GBM s ultra nízkym počtom pasáží z čerstvého aj vitálne kryokonzervovaného nádorového materiálu s cieľom zachovať molekulárne a funkčné charakteristiky špecifické pre daného pacienta.

HROG33 T0 M1 vykazuje adhezívny rast s morfológiou podobnou fibroblastom, typickou pre primárne kultúry GBM. Bunky tvoria monovrstvu a vykazujú konzistentnú proliferačnú schopnosť in vitro. V porovnávacej štúdii párových kultúr odvodených z čerstvého a kryokonzervovaného nádorového tkaniva neboli zaznamenané žiadne významné rozdiely v morfológii, kinetike rastu ani reakcii na lieky. Imunofenotypová charakterizácia reprezentatívnych bunkových línií HROG preukázala expresiu markerov spojených s neurálnou líniou, vrátane glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestinu a vimentínu, čo je v súlade s fenotypom odvodeným z gliómu. Molekulárne analýzy vykonané v rámci série HROG zahŕňali hodnotenie metylácie promotora MGMT, amplifikácie EGFR a mutačného stavu TP53, IDH1/2, KRAS a BRAF, čo potvrdzuje zachovanie nádorovo špecifických genomických vlastností v etablovaných kultúrach.

Funkčne boli bunky odvodené z HROG hodnotené z hľadiska citlivosti na štandardnú liečbu a skúmané látky používané v terapii GBM, vrátane temozolomidu, BCNU (karmustínu), vinkristínu a imatinibu. Profily reakcie na lieky u párov zodpovedajúcich buniek indikovali stabilné a reprodukovateľné farmakologické správanie po kryokonzervácii tkaniva. Ako primárny model GBM s ultra nízkym počtom pasáží poskytuje HROG33 T0 M1 klinicky relevantný in vitro systém na skúmanie biológie glioblastómu, predikciu terapeutického odpovede a heterogenitu nádorov špecifických pre jednotlivých pacientov, pričom minimalizuje artefakty spojené s dlhodobou nepretržitou adaptáciou bunkových línií.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke