HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1は、WHOグレードIVの膠芽腫を左後頭側頭部に有する成人女性患者から摘出された新鮮腫瘍組織を由来とする、ヒト膠芽腫（GBM）の初代細胞株である。 「T0」は初回診断時の原発腫瘍を指し、「M1」は当該検体から樹立された対応するin vitroモデルを示す。本細胞株は、患者固有の分子的・機能的特性を保持することを目的として、生鮮および凍結保存された腫瘍材料から超低継代GBM培養を樹立する体系的な取り組みの一環として作成された。

HROG33 T0 M1は、原発性GBM培養に典型的な線維芽細胞様形態を示す接着性増殖を示す。細胞は単層を形成し、in vitroで一貫した増殖能を示す。 比較樹立研究において、生鮮腫瘍組織および凍結保存腫瘍組織由来の対照培養は、形態、増殖動態、薬剤応答性に有意差を示さなかった。代表的なHROG細胞株の免疫表現型解析では、グリア線維酸性タンパク質（GFAP）、ネスチン、ビメンチンを含む神経系関連マーカーの発現が確認され、膠芽腫由来の表現型と一致した。 HROGシリーズ全体で実施した分子解析には、MGMTプロモーターメチル化、EGFR増幅、およびTP53、IDH1/2、KRAS、BRAFの変異状態の評価が含まれ、樹立培養における腫瘍特異的ゲノム特徴の保持を支持した。

機能面では、HROG由来細胞株はテモゾロミド、BCNU（カルムスチン）、ビンクリスチン、イマチニブなど、GBM治療で使用される標準治療薬および治験薬に対する感受性が評価された。対照細胞株ペアの薬剤応答プロファイルは、組織凍結保存後も安定かつ再現性のある薬理学的挙動を示した。 超低継代一次GBMモデルであるHROG33 T0 M1は、膠芽腫の生物学的特性、治療反応予測、患者特異的腫瘍異質性の調査に臨床的に関連性の高いin vitroシステムを提供すると同時に、長期連続細胞株適応に伴うアーティファクトを最小限に抑える。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。