HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 is een primaire humane glioblastoma multiforme (GBM) cellijn die is opgezet uit vers verwijderd tumorweefsel van een volwassen vrouwelijke patiënt met WHO-graad IV glioblastoma in het linker occipitotemporale gebied. De aanduiding "T0" verwijst naar de primaire tumor bij de eerste diagnose en "M1" geeft het overeenkomstige in-vitromodel aan dat van dit monster is afgeleid. De cellijn is gegenereerd als onderdeel van een systematische poging om GBM-culturen met ultralage passage te kweken uit zowel vers als vitaal cryopreserveerd tumormateriaal, met als doel de patiëntspecifieke moleculaire en functionele kenmerken te behouden.

HROG33 T0 M1 vertoont een hechtende groei met een fibroblast-achtige morfologie die typisch is voor primaire GBM-culturen. De cellen vormen een monolaag en vertonen in vitro een consistent proliferatief vermogen. In de vergelijkende vestigingsstudie vertoonden gepaarde culturen afkomstig van vers en cryopreserveerd tumorweefsel geen significante verschillen in morfologie, groeikinetiek of respons op geneesmiddelen. Immunofenotypische karakterisering van representatieve HROG-cellijnen toonde expressie aan van markers die geassocieerd zijn met de neurale afstamming, waaronder gliaal fibrillair zuur eiwit (GFAP), nestine en vimentine, in overeenstemming met een van glioom afkomstig fenotype. Moleculaire analyses die over de HROG-reeks werden uitgevoerd, omvatten beoordeling van MGMT-promotormethylatie, EGFR-amplificatie en mutatiestatus van TP53, IDH1/2, KRAS en BRAF, wat het behoud van tumorspecifieke genomische kenmerken in gevestigde culturen ondersteunt.

Functioneel zijn HROG-afgeleide cellijnen geëvalueerd op gevoeligheid voor standaardbehandelingen en onderzoeksgeneesmiddelen die worden gebruikt bij GBM-therapie, waaronder temozolomide, BCNU (carmustine), vincristine en imatinib. De geneesmiddelresponsprofielen van bijpassende cellijnparen gaven een stabiel en reproduceerbaar farmacologisch gedrag aan na cryopreservatie van weefsel. Als een primair GBM-model met ultralage passage biedt HROG33 T0 M1 een klinisch relevant in-vitrosysteem voor het onderzoeken van de biologie van glioblastoom, het voorspellen van de therapeutische respons en de tumorspecifieke heterogeniteit van patiënten, terwijl artefacten die verband houden met langdurige continue aanpassing van de cellijn tot een minimum worden beperkt.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring