HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 ir primārā cilvēka glioblastoma multiforme (GBM) šūnu līnija, kas izveidota no svaigi izgriezta audzēja audiem pieaugušai sievietei ar IV pakāpes glioblastomu, kas atrodas kreisajā pakauša-smadzeņu daļā. Apzīmējums „T0” attiecas uz primāro audzēju sākotnējā diagnozē, bet „M1” apzīmē atbilstošo in vitro modeli, kas iegūts no šī parauga. Šūnu līnija tika izveidota kā daļa no sistemātiskām pūlēm izveidot ultra-zemas pasāžas GBM kultūras gan no svaiga, gan vitāli kriokonservēta audzēja materiāla, ar mērķi saglabāt pacientam specifiskas molekulārās un funkcionālās īpašības.

HROG33 T0 M1 uzrāda adhezīvu augšanu ar fibroblastveida morfoloģiju, kas ir tipiska primārajām GBM kultūrām. Šūnas veido monoslāni un in vitro uzrāda stabilu proliferatīvo spēju. Salīdzinošajā izveides pētījumā pāriem kultūrām, kas iegūtas no svaiga un kriokonservēta audzēja audu, nebija novērotas nozīmīgas atšķirības morfoloģijā, augšanas kinētikā vai reakcijā uz zālēm. Reprezentatīvo HROG šūnu līniju imunofenotipiskā raksturošana parādīja neironu cilts līnijas marķieru ekspresiju, tostarp gliofibrilārā skābā proteīna (GFAP), nestīna un vimentīna, kas atbilst gliomas fenotipam. HROG sērijā veiktās molekulārās analīzes ietvēra MGMT promotora metilācijas, EGFR amplifikācijas un TP53, IDH1/2, KRAS un BRAF mutāciju statusa novērtējumu, kas apstiprināja audzējam specifisku genomisko iezīmju saglabāšanos izveidotajās kultūrās.

Funkcionāli HROG atvasinātās šūnu līnijas ir novērtētas attiecībā uz jutību pret standarta aprūpes un izpētes līdzekļiem, ko izmanto GBM terapijā, tostarp temozolomīdu, BCNU (karmustīnu), vinkristīnu un imatinibu. Atbilstošo šūnu līniju pāru zāļu reakcijas profili liecināja par stabilu un reproducējamu farmakoloģisko uzvedību pēc audu kriokonservācijas. Kā primārais GBM modelis ar ļoti zemu pasāžu skaitu, HROG33 T0 M1 nodrošina klīniski nozīmīgu in vitro sistēmu glioblastomas bioloģijas izpētei, terapeitiskās reakcijas prognozēšanai un pacientam specifiskas audzēja heterogenitātes izpētei, vienlaikus samazinot artefaktus, kas saistīti ar ilgtermiņa nepārtrauktu šūnu līnijas adaptāciju.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu