HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 er en primær humant glioblastoma multiforme (GBM) cellelinje etablert fra ferskt resektert tumorvev fra en voksen kvinnelig pasient med WHO grad IV glioblastoma lokalisert i venstre occipitotemporal region. Betegnelsen «T0» refererer til den primære svulsten ved første diagnose, og «M1» angir den tilsvarende in vitro-modellen avledet fra dette prøven. Cellelinjen ble generert som en del av et systematisk arbeid for å etablere GBM-kulturer med svært lav passasje fra både ferskt og vitalt kryokonservert svulstmateriale, med sikte på å bevare pasientspesifikke molekylære og funksjonelle egenskaper.

HROG33 T0 M1 viser vedheftende vekst med en fibroblastlignende morfologi som er typisk for primære GBM-kulturer. Cellene danner et monolag og viser konsistent proliferativ kapasitet in vitro. I den komparative etableringsstudien viste parvise kulturer avledet fra ferskt og kryokonservert tumorvev ingen signifikante forskjeller i morfologi, vekstkinetikk eller respons på legemidler. Immunofenotypisk karakterisering av representative HROG-cellelinjer viste ekspresjon av markører assosiert med nevral linje, inkludert glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestin og vimentin, i samsvar med en gliomavledet fenotype. Molekylære analyser utført på tvers av HROG-serien inkluderte vurdering av MGMT-promotormetylering, EGFR-amplifikasjon og mutasjonsstatus for TP53, IDH1/2, KRAS og BRAF, noe som støtter bevaring av tumorspesifikke genomiske egenskaper i etablerte kulturer.

Funksjonelt har HROG-avledede cellelinjer blitt evaluert for følsomhet overfor standardbehandling og forsøksmidler som brukes i GBM-terapi, inkludert temozolomid, BCNU (karmustin), vinkristin og imatinib. Legemiddelresponsprofilene til matchede cellelinjepar indikerte stabil og reproduserbar farmakologisk atferd etter vevskryopreservering. Som en primær GBM-modell med ultralav passasje gir HROG33 T0 M1 et klinisk relevant in vitro-system for å undersøke glioblastombiologi, prediksjon av terapeutisk respons og pasientspesifikk tumorheterogenitet, samtidig som artefakter assosiert med langvarig kontinuerlig tilpasning av cellelinjer minimeres.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring