HROG33 T0 M1

HROG33 T0 M1 on primaarne inimese glioblastoma multiforme (GBM) rakuliin, mis on loodud täiskasvanud naispatsiendi värskelt resekteeritud kasvajakoest, kellel oli WHO IV astme glioblastoma vasakus okcipito-temporaalses piirkonnas. Tähis „T0” viitab esmasele kasvajale esialgse diagnoosi ajal ja „M1” tähistab vastavat in vitro mudelit, mis on saadud sellest proovist. Rakuliin loodi osana süstemaatilisest tööst, mille eesmärk oli luua ultra-madala passaažiga GBM kultuurid nii värskest kui ka vitamiinidega krüokonserveeritud kasvajamaterjalist, et säilitada patsiendispetsiifilised molekulaarsed ja funktsionaalsed omadused.

HROG33 T0 M1 näitab adhesiivset kasvu fibroblastide-sarnase morfoloogiaga, mis on tüüpiline esmaste GBM-kultuuride puhul. Rakud moodustavad monokihi ja näitavad in vitro ühtlast proliferatiivset võimet. Võrdlevas uuringus ei näidanud värskest ja krüokonserveeritud kasvajakoest saadud paarikultuurid olulisi erinevusi morfoloogias, kasvukineetikas ega ravimireaktsioonis. Esinduslike HROG rakuliinide immunofenotüübiline iseloomustus näitas närvirakkude liiniga seotud markerite, sealhulgas gliaalsete fibrillaarse happelise valgu (GFAP), nestini ja vimentiini ekspressiooni, mis on kooskõlas glioomist saadud fenotüübiga. HROG seeria molekulaaranalüüsid hõlmasid MGMT promootori metülatsiooni, EGFR amplifikatsiooni ja TP53, IDH1/2, KRAS ja BRAF mutatsioonide staatuse hindamist, mis toetas kasvajaspetsiifiliste genoomiliste omaduste säilimist loodud kultuurides.

Funktsionaalselt on HROG-st pärinevaid rakuliine hinnatud tundlikkuse suhtes GBM-ravis kasutatavatele standardravimitele ja uuritavatele ravimitele, sealhulgas temozolomidile, BCNU-le (karmustiinile), vinkristiinile ja imatinibile. Sobivate rakuliinide paaride ravimireaktsiooniprofiilid näitasid stabiilset ja reprodutseeritavat farmakoloogilist käitumist pärast kudede krüokonserveerimist. Ultra-madala passaažiga primaarse GBM mudelina pakub HROG33 T0 M1 kliiniliselt asjakohast in vitro süsteemi glioblastoomi bioloogia, ravivastuse prognoosimise ja patsiendispetsiifilise kasvaja heterogeensuse uurimiseks, minimeerides samal ajal pikaajalise pideva rakuliini adapteerumisega seotud artefakte.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest