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Medien und Reagenzien

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Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

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Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

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Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Fortschrittliches Wachstumsmedium für Endothelzellen

Das „Advanced Endothelial Cell Growth Medium“ wird für die Kultivierung menschlicher Endothelzellen aus großen Gefäßen verwendet. Definierte humane rekombinante Wachstumsfaktoren, darunter VEGF und Long R3 IGF-1, ersetzen das rohe Endothelzell-Wachstumssupplement. Das Komplettmedium enthält fötales Kälberserum, L-Glutamin, Heparin, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, Ascorbinsäure und Hydrocortison. Für eine schnellere Vermehrung mit einem höheren Serumgehalt wählen Sie das Endothelial Cell Proliferation Medium. Für eine Formulierung ohne VEGF wählen Sie das „Endothelial Cell Growth Medium“. Wir bieten das Medium als 500-ml-Basalmedium an, entweder allein oder zusammen mit den Zusätzen, entweder als Einzelkomponenten oder als vorgemischten „Supplement-Mix“. Die einzelnen Komponenten ermöglichen es, einzelne Faktoren anzupassen oder wegzulassen, während die Supplement-Mix-Mischung in einem einzigen Schritt hinzugefügt wird. Das Basalmedium ist in denselben Formaten auch phenolrotfrei erhältlich, wodurch Störungen bei fluoreszenzbasierten und kolorimetrischen Messungen sowie die schwache östrogenähnliche Aktivität von Phenolrot vermieden werden. Für die Verwendung sind Ergänzungsmittel erforderlich, und beide Ergänzungsformate sind auch separat erhältlich. Nach Zugabe der Ergänzungsmittel enthält das fertige Medium 2 % FCS (10 ml pro 500 ml Basalmedium).

€180.00

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Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

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DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l Glukose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/l NaHCO₃

DMEM:Ham’s F12 ist ein weithin anerkanntes und häufig verwendetes Basalmedium in der Zellkultur für die biologische Forschung. Es dient als grundlegende Nährstoffquelle für das Wachstum verschiedener Säugetierzelllinien, insbesondere wenn es mit fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt wird. Diese einzigartige Formulierung kombiniert Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) und Ham’s F-12 (Ham’s Nutrient Mixture F-12) im exakten Verhältnis 1:1. Die Zugabe von L-Glutamin verbessert die Zusammensetzung zusätzlich. DMEM, abgeleitet vom „Eagle’s Minimal Essential Medium“ (EMEM), bietet im Vergleich zu seinem Vorgänger eine erhöhte Konzentration an Aminosäuren und Vitaminen. Im Gegensatz dazu basiert Ham’s F-12 auf dem Ham’s F-10-Medium und liefert eine ergänzende Reihe essenzieller Bestandteile. Um ein optimales Zellwachstum zu unterstützen, ist es gängige Praxis, DMEM:Ham’s F-12 mit FBS in einer typischen Konzentration von 5–10 % zu ergänzen. Diese Zugabe ist notwendig, da dem Medium Wachstumshormone, Lipide und Proteine fehlen, die für die Zellentwicklung entscheidend sind. DMEM:Ham’s F12 enthält ein pH-Puffersystem und wird häufig mit Phenolrot, einem pH-Indikator, versetzt. Kultivierte Zellen in DMEM:Ham’s F12 oder jedem anderen Medium, das das Bicarbonat-Puffersystem nutzt, benötigen eine kontrollierte CO₂-Umgebung von 5–10 %, um angemessene pH-Werte aufrechtzuerhalten. Qualitätskontrolle • Steril gefiltert Lagerung und Haltbarkeit • Bei +2 °C bis +8 °C lichtgeschützt lagern. • Nach dem Öffnen bei 4 °C lagern und innerhalb von 6–8 Wochen verbrauchen. Versandbedingungen • Raumtemperatur Lagerung • Im Dunkeln bei +2 °C bis +8 °C gekühlt lagern. Ein Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37 °C ist zu vermeiden, da dies die Produktqualität beeinträchtigt. • Erhitzen Sie das Medium nicht über 37 °C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellen. • Soll nur ein Teil des Mediums verwendet werden, entnehmen Sie die benötigte Menge und erwärmen Sie diese vor der Verwendung auf Raumtemperatur. Zusammensetzung Kategorie Bestandteile Konzentration (mg/L) Aminosäuren Glycin 18,75 L-Alanin 4,45 L-Arginin-HCl 147,50 L-Asparagin-H₂O 7,50 L-Asparaginsäure 6,65 L-Cystein-HCl-H₂O 17,56 L-Cystin-2-HCl 31,29 L-Glutaminsäure 7,35 L-Glutamin 365,00 L-Histidin-HCl-H₂O 31,48 L-Isoleucin 54,47 L-Leucin 59,05 L-Lysin-HCl 91,25 L-Methionin 17,24 L-Phenylalanin 35,48 L-Prolin 17,25 L-Serin 26,25 L-Threonin 53,45 L-Tryptophan 9,02 L-Tyrosin-2-Na-2-H₂O 55,79 L-Valin 52,85 Vitamine D-Biotin 0,0035 Cholinchlorid 8,98 D-Calciumpantothenat 2,24 Folsäure 2,66 Myo-Inositol 12,60 Nicotinamid 2,02 Pyridoxin-HCl 0,031 Pyridoxal-HCl 2,00 Riboflavin 0,219 Thiamin-HCl 2,17 Vitamin B12 0,68 Anorganische Salze CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5 H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,05 FeSO₄·7H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂·6 H₂O 61,20 MgSO₄·7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2 H₂O 70,87 ZnSO₄·7 H₂O 0,432 Sonstige Bestandteile D-Glucose 3151,00 Hypoxanthin 2,40 HEPES 3574,50 Linolsäure 0,042 Liponsäure 0,105 Phenolrot-Natriumsalz 8,63 Putrescin-2-HCl 0,081 Natrium-Pyruvat 55,00 Thymidin 0,365

€25.00

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DMEM, w: 4,5 g/l Glukose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/l NaHCO₃, w: 1,0 mM Natriumpyruvat

DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) ist ein äußerst vielseitiges und weit verbreitetes Basalmedium, das entwickelt wurde, um das Wachstum einer Vielzahl von Säugetierzellen in der biologischen Forschung zu unterstützen. Es eignet sich ideal für die Kultivierung von primären Fibroblasten, Neuronen, Gliazellen, HUVECs, glatten Muskelzellen sowie gängigen Zelllinien wie HeLa, 293, Cos-7 und PC-12. Was DMEM von anderen Medien unterscheidet, ist seine einzigartige Zusammensetzung. Es enthält im Vergleich zum ursprünglichen „Eagle’s Minimal Essential Medium“ eine um das Vierfache erhöhte Konzentration an Aminosäuren und Vitaminen. Ursprünglich mit niedrigem Glukosegehalt (1 g/l) und Natriumpyruvat entwickelt, wird DMEM häufig mit höheren Glukosekonzentrationen eingesetzt, entweder mit oder ohne Natriumpyruvat. Bemerkenswert ist, dass DMEM keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren enthält, sodass eine Ergänzung erforderlich ist. Um ein optimales Wachstum zu erreichen, wird DMEM üblicherweise mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt. Zudem nutzt DMEM ein Natriumbicarbonat-Puffersystem, das eine Umgebung mit 5–10 % CO₂ erfordert, um einen physiologischen pH-Wert aufrechtzuerhalten. Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) genießt unter den definierten Medien für die Zell- und Gewebekultur hohes Ansehen und erfüllt die Wachstumsanforderungen verschiedener adhärenter Zellphänotypen. Es übertrifft das ursprüngliche Eagle-Medium, das in den 1950er Jahren für die Kultivierung von Hühnerzellen entwickelt wurde, durch die verbesserte Zusatzformulierung, die als Dulbecco-Modifikation bekannt ist. Diese Modifikation erhöht den Gehalt an ausgewählten Aminosäuren und Vitaminen im Vergleich zum ursprünglichen Medium erheblich, bis zum Vierfachen. Im Bereich der Zellkultur spielt DMEM eine entscheidende Rolle als Wachstumsmedium für verschiedene Zelltypen, darunter Primärzellen, Stammzellen und transformierte Zellen. Forscher setzen die modifizierte Version von DMEM zudem für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen ein, wie beispielsweise in der Wirkstoffforschung, im Tissue Engineering und bei der Untersuchung von zellulären Signalwegen. Qualitätskontrolle • Steril gefiltert Lagerung und Haltbarkeit • Bei +2 °C bis +8 °C lichtgeschützt lagern. • Nach dem Öffnen bei 4 °C lagern und innerhalb von 6–8 Wochen verbrauchen. Versandbedingungen • Raumtemperatur Lagerung • Im Dunkeln bei +2 °C bis +8 °C gekühlt lagern. Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37 °C vermeiden, da dies die Produktqualität beeinträchtigt. • Erhitzen Sie das Medium nicht über 37 °C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellen. • Soll nur ein Teil des Mediums verwendet werden, entnehmen Sie die benötigte Menge und erwärmen Sie diese vor der Verwendung auf Raumtemperatur. Zusammensetzung Kategorie Bestandteile Konzentration (mg/l) Aminosäuren Glycin 30,00 L-Arginin-HCl 84,00 L-Cystin-2-HCl 62,57 L-Glutamin 584,00 L-Histidin-HCl-H₂O 42,00 L-Isoleucin 105,00 L-Leucin 105,00 L-Lysin-HCl 146,00 L-Methionin 30,00 L-Phenylalanin 66,00 L-Serin 42,00 L-Threonin 95,00 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosin-2-Na-2H₂O 103,79 L-Valin 94,00 Vitamine Cholinchlorid 4,00 D-Calciumpantothenat 4,00 Folsäure 4,00 Myo-Inositol 7,20 Nicotinamid 4,00 Pyridoxal-HCl 4,00 Riboflavin 0,40 Thiamin-HCl 4,00 Anorganische Salze CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄·7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Sonstige Bestandteile D-Glukose 4500,00 Phenolrot-Natriumsalz 15,90 Natriumpyruvat 110,00

€25.00

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EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO₃, w: EBSS

Das Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) ist eines der am häufigsten verwendeten Basalmedien für die Kultivierung einer breiten Palette von Säugetierzellen, insbesondere von adhärenten Zelllinien. Diese ursprünglich von Harry Eagle entwickelte klassische Formulierung enthält die essentiellen Aminosäuren, Vitamine und anorganischen Salze, die für das Wachstum sowohl von Primärzellen als auch von etablierten Zelllinien unter Standardkulturbedingungen erforderlich sind. Diese gebrauchsfertige, steril gefilterte flüssige Formulierung ist mit Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-Glutamin, D-Glukose (1,0 g/l) und 2,2 g/l Natriumbicarbonat (NaHCO₃), wodurch es für den Einsatz in einer CO₂-geregelten Inkubatoratmosphäre (typischerweise 5 % CO₂) geeignet ist. Das enthaltene Phenolrot dient als pH-Indikator und ermöglicht eine bequeme visuelle Überwachung des Mediumzustands während der Zellkultur. Hauptmerkmale • Klassische Eagle’s-MEM-Formulierung mit Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS) • 2 mM L-Glutamin enthalten – sofort einsatzbereit • 2,2 g/l Natriumbicarbonat – gepuffert für die Inkubation bei 5 % CO₂ • Mit D-Glukose (1,0 g/l) als primäre Kohlenstoffquelle • Mit Phenolrot als pH-Indikator • Ohne HEPES und ohne Natriumpyruvat • Sterilgefiltertes flüssiges Medium, gebrauchsfertig • pH-Wert 7,0 – 7,6 Typische Anwendungen EMEM eignet sich für die Kultivierung einer Vielzahl von Säugetierzelllinien, darunter HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 sowie zahlreiche Primärzellen. Zu den gängigen Anwendungen gehören: • Routinemäßige Pflege und Vermehrung adhärenter Zelllinien • Arbeitsabläufe zur Virusvermehrung und Impfstoffherstellung • Zytotoxizitäts- und Bioassay-Anwendungen • Transfektions- und Proteinexpressionsstudien • Grundlagenforschung in der Zellbiologie und Molekularbiologie Für ein optimales Zellwachstum wird EMEM in der Regel mit 5–10 % fötalem Rinderserum (FBS) und, je nach Zelllinie, mit nicht-essentiellen Aminosäuren (NEAA) sowie Antibiotika wie Penicillin/Streptomycin ergänzt. Handhabung und Lagerung Lagern Sie die ungeöffnete Flasche bei +2 °C bis +8 °C, geschützt vor Licht. Nach dem Öffnen unter aseptischen Bedingungen verwenden. L-Glutamin in Lösung unterliegt einem allmählichen Abbau – wir empfehlen, das Medium für eine optimale Leistung innerhalb von 4 Wochen nach dem Öffnen zu verbrauchen oder bei längerer Lagerung vor der Verwendung mit frischem L-Glutamin anzureichern. Lassen Sie das Medium auf 37 °C erwärmen, bevor Sie es zu den Zellen geben. Qualität Hergestellt unter strengen Qualitätsstandards. Jede Charge wird auf Sterilität, pH-Wert, Osmolalität und Endotoxingehalt geprüft, um eine gleichbleibende Leistung bei Zellkulturanwendungen zu gewährleisten. Produktspezifikationen Spezifikation Detail ProdukttypMEM ProduktkategorieZellkulturmedien FormatFlüssig SterilJa Größe500 ml L-GlutaminMit L-Glutamin (2 mM) GlukoseMit Glukose (1,0 g/l) NatriumhydrogencarbonatMit NaHCO₃ (2,2 g/L) HEPESOhne HEPES Natrium-PyruvatOhne Natriumpyruvat PhenolrotMit Phenolrot SalzlösungEarle’s Balanced Salt Solution (EBSS) pH7,0 – 7,6 EndotoxingehaltNicht angegeben Lagerung+2 °C bis +8 °C Zusammensetzung (pro Liter)

€25.00

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Gefriermedium CM-1 – 100 ml

Das Freeze Medium CM-1 von Cytion ist ein hochmodernes Kryokonservierungsmedium, das entwickelt wurde, um nach dem Auftauen ein Höchstmaß an Zellviabilität und -funktionalität zu gewährleisten. Dieses vielseitige Medium eignet sich für ein breites Spektrum an Zelltypen, darunter sowohl menschliche als auch tierische Zellen, und ist damit ein unverzichtbares Hilfsmittel für vielfältige Forschungsanwendungen. Das Freeze Medium CM-1 basiert auf einer sorgfältig ausgewogenen Kombination aus Kryoprotektiva und essenziellen Nährstoffen und minimiert die Bildung von Eiskristallen sowie den zellulären Stress während des Einfrierprozesses, wodurch die Zellintegrität gewahrt bleibt. Zu den wichtigsten Merkmalen von Freeze Medium CM-1 gehören: • Breite Kompatibilität: Wirksam für eine Vielzahl von Zelltypen, darunter Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien. • Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert zur Maximierung der Zellrückgewinnung und Lebensfähigkeit nach dem Auftauen, wodurch zuverlässige Versuchsergebnisse gewährleistet werden. • Gebrauchsfertig: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für den sofortigen Einsatz, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden. • Verbesserte Stabilität: Behält unter Standardbedingungen der Kryokonservierung eine gleichbleibende Leistungsfähigkeit bei und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse. • Lange Haltbarkeit: CM-1 ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank gelagert werden kann. Verwendung von CM-1 zum Einfrieren von Zellen Befolgen Sie diese Schritte, um CM-1 zum Einfrieren von sowohl adhärenten als auch Suspensionszellen zu verwenden: • Bei adhärenten Zellen waschen Sie diese und lösen Sie sie vom Kultursubstrat ab. Bei Suspensionszellen fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort. • Zählen Sie die Zellen, um sicherzustellen, dass sie die richtige Konzentration aufweisen. • Zentrifugieren Sie die Zellen, um sie zu pelletieren, und resuspendieren Sie sie anschließend in CM-1-Gefriermedium. • Übertragen Sie die resuspendierten Zellen in Kryoröhrchen. • Wenden Sie ein Langsamgefrierverfahren an, bevor Sie die Zellen zur Langzeitlagerung überführen. Verfahren Beschreibung Schritte ❄️ Manuelles Einfrieren Eine Schritt-für-Schritt-Methode mit schrittweiser Temperaturabsenkung, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten. 1️⃣ Die Zellen im Einfriermedium 40 Minuten lang in einen Gefrierschrank bei 4 °C legen. 2️⃣ Anschließend für 24 Stunden in einen Gefrierschrank bei -80 °C überführen. 3️⃣ Die Zellen zur Langzeitkonservierung in flüssigem Stickstoff lagern. ❄️ Verwendung von „Mr. Frosty“ Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfriergeschwindigkeiten ohne Stromanschluss ermöglicht. 1️⃣ Bereiten Sie die Zellen in Kryoröhrchen mit Gefriermedium vor. 2️⃣ Stellen Sie die Kryoröhrchen in den Mr. Frosty-Behälter. 3️⃣ Lagern Sie sie 24 Stunden lang bei -80 °C, bevor Sie sie in flüssigen Stickstoff überführen. ❄️ Gefrierschrank mit kontrollierter Gefriergeschwindigkeit Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist. 1️⃣ Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird. 2️⃣ Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank. 3️⃣ Überführen Sie die Zellen nach Abschluss des Gefrierzyklus in flüssigen Stickstoff. • Lagern Sie die Kryoröhrchen zur Langzeitkonservierung bei Temperaturen unter -130 °C oder in flüssigem Stickstoff. Inhaltsstoffe • Enthält FBS, DMSO, Glukose, Salze • Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6 Das Freeze Medium CM-1 von Cytion bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung und gewährleistet eine hohe Zellviabilität und Funktionalität nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen.

€99.00

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Gefriermedium CM-1 – 50 ml

Das Freeze Medium CM-1 von Cytion ist ein hochmodernes Kryokonservierungsmedium, das entwickelt wurde, um nach dem Auftauen ein Höchstmaß an Zellviabilität und -funktionalität zu gewährleisten. Dieses vielseitige Medium eignet sich für ein breites Spektrum an Zelltypen, darunter sowohl menschliche als auch tierische Zellen, und ist damit ein unverzichtbares Hilfsmittel für vielfältige Forschungsanwendungen. Das Freeze Medium CM-1 basiert auf einer sorgfältig ausgewogenen Kombination aus Kryoprotektiva und essenziellen Nährstoffen und minimiert die Bildung von Eiskristallen sowie den zellulären Stress während des Einfrierprozesses, wodurch die Zellintegrität gewahrt bleibt. Zu den wichtigsten Merkmalen von Freeze Medium CM-1 gehören: • Breite Kompatibilität: Wirksam für eine Vielzahl von Zelltypen, darunter Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien. • Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert zur Maximierung der Zellrückgewinnung und Lebensfähigkeit nach dem Auftauen, wodurch zuverlässige Versuchsergebnisse gewährleistet werden. • Gebrauchsfertig: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für den sofortigen Einsatz, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden. • Verbesserte Stabilität: Behält unter Standardbedingungen der Kryokonservierung eine gleichbleibende Leistungsfähigkeit bei und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse. • Lange Haltbarkeit: CM-1 ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank gelagert werden kann. Verwendung von CM-1 zum Einfrieren von Zellen Befolgen Sie diese Schritte, um CM-1 zum Einfrieren von sowohl adhärenten als auch Suspensionszellen zu verwenden: • Bei adhärenten Zellen waschen Sie diese ab und lösen Sie sie vom Kultursubstrat. Bei Suspensionszellen fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort. • Zählen Sie die Zellen, um sicherzustellen, dass sie die richtige Konzentration aufweisen. • Zentrifugieren Sie die Zellen, um sie zu pelletieren, und resuspendieren Sie sie anschließend in CM-1-Gefriermedium. • Übertragen Sie die resuspendierten Zellen in Kryoröhrchen. • Wenden Sie ein Langsamgefrierverfahren an, bevor Sie die Zellen zur Langzeitlagerung überführen. Verfahren Beschreibung Schritte ❄️ Manuelles Einfrieren Eine Schritt-für-Schritt-Methode mit schrittweiser Temperaturabsenkung, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten. 1️⃣ Die Zellen im Einfriermedium 40 Minuten lang in einen Gefrierschrank bei 4 °C legen. 2️⃣ Anschließend für 24 Stunden in einen Gefrierschrank bei -80 °C überführen. 3️⃣ Die Zellen zur Langzeitkonservierung in flüssigem Stickstoff lagern. ❄️ Verwendung von „Mr. Frosty“ Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfriergeschwindigkeiten ohne Stromanschluss ermöglicht. 1️⃣ Bereiten Sie die Zellen in Kryoröhrchen mit Gefriermedium vor. 2️⃣ Stellen Sie die Kryoröhrchen in den Mr. Frosty-Behälter. 3️⃣ Lagern Sie sie 24 Stunden lang bei -80 °C, bevor Sie sie in flüssigen Stickstoff überführen. ❄️ Gefrierschrank mit kontrollierter Gefriergeschwindigkeit Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist. 1️⃣ Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird. 2️⃣ Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank. 3️⃣ Überführen Sie die Zellen nach Abschluss des Gefrierzyklus in flüssigen Stickstoff. • Lagern Sie die Kryoröhrchen zur Langzeitkonservierung bei Temperaturen unter -130 °C oder in flüssigem Stickstoff. Inhaltsstoffe • Enthält FBS, DMSO, Glukose, Salze • Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6 Das Freeze Medium CM-1 von Cytion bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung und gewährleistet eine hohe Zellviabilität und -funktionalität nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen.

€59.00

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Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,5 g/l NaHCO₃

Wir stellen Ihnen das Ham’s F-12K (Kaighn’s)-Medium vor, eine spezielle Modifikation des Ham’s F-12-Mediums, das speziell auf die besonderen Anforderungen der biologischen Forschung zugeschnitten ist. Dieses fortschrittliche Medium bietet deutliche Vorteile und verbessert die Kultivierung von primären menschlichen Hepatozyten sowie von Ratten- und Hühnerleberzellen, insbesondere unter serumreduzierten Bedingungen. Das Ham's F-12K (Kaighn's) Medium wurde sorgfältig formuliert, um die Zellkulturbedingungen zu optimieren. Es zeichnet sich durch eine angereicherte Zusammensetzung aus, die erhöhte Konzentrationen essenzieller Bestandteile wie Aminosäuren und Natriumpyruvat sowie zusätzliche Elemente wie Putrescin, Thymidin, Hypoxanthin und Zink enthält. Diese Zusätze ermöglichen es Forschern, das Medium mit minimalem Serum oder definierten Komponenten für bestimmte Zelltypen zu ergänzen, was präzise Versuchsbedingungen erleichtert. Bemerkenswert ist, dass das Ham’s F-12K (Kaighn’s)-Medium keine Proteine oder Wachstumsfaktoren enthält. Daher ist häufig eine Ergänzung mit Wachstumsfaktoren und fötalem Rinderserum (FBS) erforderlich, wodurch Forscher das Medium auf die Anforderungen ihrer spezifischen Zelllinien zuschneiden können. Für eine optimale Leistung muss die FBS-Konzentration für jede Zelllinie sorgfältig optimiert werden, um ein optimales Wachstum und eine optimale Funktionalität sicherzustellen. Zur Aufrechterhaltung eines physiologischen pH-Werts nutzt das Ham’s F-12K (Kaighn’s)-Medium ein Natriumbicarbonat-Puffersystem (2,5 g/l), was während der Kultivierung eine kontrollierte CO₂-Konzentration von 5–10 % erfordert. Dadurch wird sichergestellt, dass der pH-Wert des Mediums im idealen Bereich für Zellwachstum und Lebensfähigkeit bleibt. Qualitätskontrolle • pH-Wert = 7,2 ± 0,02 bei 20–25 °C. • Jede Charge wurde auf Sterilität sowie auf das Fehlen von Mykoplasmen und Bakterien geprüft. Lagerung • Im Dunkeln bei +2 °C bis +8 °C gekühlt lagern. Ein Einfrieren sowie eine Erwärmung auf bis zu +37 °C beeinträchtigen die Qualität des Produkts. • Das Medium darf nicht auf über 37 °C erhitzt werden, und es dürfen keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z. B. Mikrowellenherde) verwendet werden. • Soll nur ein Teil des Mediums verwendet werden, entnehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie auf Raumtemperatur. • Die Haltbarkeit aller Medien mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum. Zusammensetzung Bestandteile mg/L Anorganische Salze Calciumchlorid x 2H₂O 135,24 Kupfer(II)-sulfat x 5H₂O 0,00 Eisen(II)-sulfat x 7H₂O 0,83 Magnesiumchlorid x 6H₂O 105,72 Magnesiumsulfat x 7H₂O 394,49 Kaliumchlorid 283,29 Kaliumdihydrogenphosphat 58,52 Natriumchlorid 7597,20 Natriumhydrogenphosphat, wasserfrei 115,02 Zinksulfat x 7H₂O 0,14 Sonstige Bestandteile D(+)-Glukose, wasserfrei 1260,00 Hypoxanthin 4,08 DL-α-Liponsäure 0,21 Phenolrot 3,00 Putrescin × 2HCl 0,32 Natriumpyruvat 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Thymidin 0,73 Aminosäuren L-Alanin 17,82 L-Arginin × HCl 421,40 L-Asparagin x H₂O 30,02 L-Asparaginsäure 26,62 L-Cystein × HCl × H₂O 70,24 L-Glutamin 292,20 L-Glutaminsäure 29,42 Glycin 15,01 L-Histidin × HCl × H₂O 41,92 L-Isoleucin 7,87 L-Leucin 26,24 L-Lysin x HCl 73,04 L-Methionin 8,95 L-Phenylalanin 9,91 L-Prolin 69,06 L-Serin 21,02 L-Threonin 23,82 L-Tryptophan 4,08 L-Tyrosin 10,87 L-Valin 23,42 Vitamine D(+)-Biotin 0,07 D-Calciumpantothenat 0,48 Cholinchlorid 13,96 Folsäure 1,32 Myo-Inositol 18,02 Nicotinamid 0,04 Pyridoxin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Thiamin x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€108.00

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Ham's F12 Medium, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,176 g/l NaHCO₃

Das Ham’s F-12-Medium, auch bekannt als Ham’s F-12-Nährstoffmischung, ist ein weit verbreitetes Basismedium, das speziell für die Zellkultur entwickelt wurde. Es wird in großem Umfang für die serumfreie Einzelzellausplattierung von CHO-Zellen (Chinese Hamster Ovary), Lungenzellen und L-Zellen der Maus eingesetzt. Darüber hinaus ist Ham’s F-12 das Medium der Wahl für einen klonalen Toxizitätstest (CTA). Einer seiner herausragenden Vorteile ist die Fähigkeit, das Zellwachstum ohne Zugabe von Serum zu unterstützen. Dadurch werden potenzielle Störungen durch Serumkomponenten vermieden, was konsistente und zuverlässige Versuchsergebnisse gewährleistet. Durch die Bereitstellung einer serumfreien Kulturumgebung bietet das Ham’s F-12-Medium Forschern eine bessere Kontrolle über ihre Untersuchungen. Ein weiteres wichtiges Merkmal des Ham’s F-12-Mediums ist seine Eignung für die Einzelzellausplattierung. Dies macht es zu einer ausgezeichneten Wahl für eine Vielzahl von Zelllinien, darunter CHO-Zellen, Lungenzellen und Maus-L-Zellen. Die optimierte Nährstoffzusammensetzung des Mediums fördert die effiziente Anhaftung und das Wachstum einzelner Zellen und ermöglicht so die Etablierung homogener Zellkulturen mit verbesserter Reproduzierbarkeit. Darüber hinaus hat sich das Ham’s F-12-Medium als bevorzugtes Medium für den Clonal Toxicity Assay (CTA) etabliert. Dieser Assay spielt eine entscheidende Rolle bei der Bewertung der zytotoxischen Wirkungen von Substanzen auf Zellen. Durch die Verwendung von Ham’s F-12-Medium im CTA können Forscher die Auswirkungen verschiedener Verbindungen oder Behandlungen auf einzelne Zellen genau bewerten und so wertvolle Erkenntnisse über toxikologische Profile gewinnen. Qualitätskontrolle • pH-Wert = 7,2 ± 0,02 bei 20–25 °C. • Jede Charge wurde auf Sterilität sowie auf das Fehlen von Mykoplasmen und Bakterien geprüft. Lagerung • Im Dunkeln bei +2 °C bis +8 °C gekühlt lagern. Einfrieren und Erwärmen auf bis zu +37 °C beeinträchtigen die Qualität des Produkts. • Das Medium darf nicht auf über 37 °C erhitzt werden; zudem dürfen keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z. B. Mikrowellenherde) verwendet werden. • Soll nur ein Teil des Mediums verwendet werden, entnehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie auf Raumtemperatur. • Die Haltbarkeit aller Medien mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum. Zusammensetzung Bestandteile mg/L Anorganische Salze Calciumchlorid x 2H₂O 44,00 Kupfer(II)-sulfat x 5H₂O 0,00 Eisen(II)-sulfat x 7H₂O 0,83 Magnesiumchlorid x 6H₂O 122,00 Kaliumchlorid 223,65 Natriumchlorid 7599,00 Dinatriumhydrogenphosphat, wasserfrei 142,04 Zinksulfat x 7H₂O 0,86 Sonstige Bestandteile D(+)-Glucose, wasserfrei 1801,60 Hypoxanthin 4,08 Linolsäure 0,08 DL-α-Liponsäure 0,21 Phenolrot 1,20 Putrescin × 2HCl 0,16 Natrium-Pyruvat 110,00 Thymidin 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Aminosäuren L-Alanin 8,91 L-Arginin x HCl 210,70 L-Asparagin x H₂O 15,01 L-Asparaginsäure 13,31 L-Cystein × HCl × H₂O 35,12 L-Alanyl-L-Glutamin 217,30 L-Glutaminsäure 14,71 Glycin 7,51 L-Histidin × HCl × H₂O 20,96 L-Isoleucin 3,94 L-Leucin 13,12 L-Lysin x HCl 36,54 L-Methionin 4,48 L-Phenylalanin 4,96 L-Prolin 34,53 L-Serin 10,51 L-Threonin 11,91 L-Tryptophan 2,04 L-Tyrosin 5,44 L-Valin 11,71 Vitamine D(+)-Biotin 0,01 D-Calciumpantothenat 0,24 Cholinchlorid 13,96 Folsäure 1,32 Myo-Inositol 18,02 Nicotinamid 0,04 Pyridoxin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Thiamin x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€25.00

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HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

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IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

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Zellkulturmedien: Ein Überblick

Im Bereich der Biowissenschaften ist die Zellkultur eine der wichtigsten Methoden. Unter dem Begriff „Zellkultur“ versteht man die Entnahme von Zellen, Geweben oder Organen aus einem Tier oder einer Pflanze und die anschließende Einbringung dieser Zellen, Gewebe oder Organe in eine künstliche Umgebung, die für ihr Überleben und/oder Wachstum günstig ist. Die grundlegenden Umweltbedingungen für eine optimale Zellentwicklung sind eine kontrollierte Temperatur, ein Substrat für die Zelladhäsion, ein geeignetes Wachstumsmedium sowie ein Inkubator, der den optimalen pH-Wert und die optimale Osmolalität aufrechterhält. Nur unter diesen Bedingungen können Zellen ihr volles Wachstumspotenzial entfalten.

Die Auswahl eines geeigneten Wachstumsmediums für die In-vitro-Kultivierung ist der Schritt in der Zellkultur, der sowohl am kritischsten als auch am wichtigsten ist. Ein Wachstumsmedium, auch als Kulturmedium bezeichnet, ist eine Flüssigkeit oder ein Gel, das so formuliert ist, dass es die Entwicklung von Organismen auf mikroskopischer, zellulärer oder pflanzenähnlicher Ebene fördert. Das zur Zellkultivierung verwendete Medium enthält häufig eine ausreichende Versorgung mit Energie und Substanzen, die den Zellzyklus steuern. Zu den Hauptbestandteilen eines Kulturmediums gehören Aminosäuren, Vitamine, anorganische Salze, Glukose und Serum. Das Serum wird dem Medium zugesetzt, da es als Quelle für Wachstumsfaktoren, Hormone und Adhäsionsfaktoren dient. Neben der Bereitstellung von Nährstoffen trägt das Medium auch zur Aufrechterhaltung des pH-Werts und der Osmolalität bei.

Arten von Medien, die in der Zellkultur verwendet werden

Sowohl menschliche als auch tierische Zellen können entweder in einem künstlichen oder synthetischen Medium oder in einem vollständig natürlichen Medium, das mit natürlichen Elementen angereichert ist, gezüchtet werden. Im Folgenden geben wir Ihnen einen Überblick über die verschiedenen derzeit verfügbaren Medientypen.

Natürliche Medien

In natürlichen Medien kommen ausschließlich biologische Flüssigkeiten vor, die in ihrem natürlichen Zustand vorliegen. Natürliche Medien sind sehr hilfreich und einfach für die Kultivierung einer breiten Vielfalt tierischer Zelltypen. Das mangelnde Verständnis der genauen Bestandteile, aus denen natürliche Medien bestehen, ist der Hauptfaktor, der zur geringen Reproduzierbarkeit der mit natürlichen Medien erzielten Ergebnisse beiträgt.

Künstliche Medien

Die Herstellung künstlicher oder synthetischer Medien umfasst die Zugabe von Nährstoffen (sowohl organischen als auch anorganischen), Serumproteinen, Kohlenhydraten, Cofaktoren, Vitaminen und Salzen sowie von O₂- und CO₂-Gasphasen [1].

Es wurden verschiedene Arten künstlicher Medien entwickelt, um eine oder mehrere der folgenden Funktionen zu erfüllen: 1) Sofortiges Überleben (eine ausgewogene Salzlösung mit genauem pH-Wert und osmotischem Druck). 2) Langfristiges Überleben (eine ausgewogene Salzlösung, ergänzt durch verschiedene Formulierungen organischer Chemikalien und/oder Serum). 3) Unbegrenzte Entwicklung. 4) Spezielle Funktionen.

Es gibt vier unterschiedliche Klassifizierungen für künstliche Medien:

Serumhaltige Medien

Die häufigste Art von Zusatzstoff in Medien zur Kultivierung tierischer Zellen ist fötales Rinderserum. Es wird dem Kulturmedium als kostengünstiger Zusatz beigemischt, um die bestmöglichen Wachstumsbedingungen zu erzielen. Das Serum dient nicht nur als Transporter oder Chelatbildner für instabile oder wasserunlösliche Nährstoffe, Hormone und Wachstumsfaktoren, Proteaseinhibitoren und andere Substanzen, sondern bindet und neutralisiert auch schädliche Moleküle.

Serumfreies Medium

Das Vorhandensein von Serum in den Medien birgt eine Reihe von Nachteilen und kann in der immunologischen Forschung zu erheblichen Fehlinterpretationen führen [2, 3]. Es wurden bereits verschiedene serumfreie Medien entwickelt [4, 5]. Diese Medien sind in der Regel speziell auf die Kultivierung eines einzelnen Zelltyps abgestimmt, wie beispielsweise „Knockout Serum Replacement“ und „Knockout DMEM“ von Thermo Fisher Scientific sowie das mTESR-Medium von Stem Cell Technologies [6] für Stammzellen [7].

Zudem enthalten diese Medien definierte Mengen an gereinigten Wachstumsfaktoren, Lipoproteinen und anderen Proteinen, die andernfalls typischerweise durch das Serum bereitgestellt werden [8]. Diese Medien werden oft als „definierte Kulturmedien“ bezeichnet, da die Bestandteile, aus denen sie bestehen, gut bekannt sind.

Chemisch definierte Medien

Diese Medien enthalten hochreine anorganische und organische Komponenten, die keinerlei Verunreinigungen aufweisen. Sie können auch reine Proteinzusätze wie Wachstumsfaktoren enthalten.

 Die genetische Modifikation von Bakterien oder Hefen führt in Verbindung mit der Zugabe bestimmter Fettsäuren, Vitamine, Cholesterin und Aminosäuren zur Produktion ihrer Bestandteile [9].

Proteinfreie Medien

Proteinfreie Medien sind solche, die überhaupt kein Protein enthalten, sondern ausschließlich nicht-proteinhaltige Bestandteile. Im Vergleich zu Medien mit Serumzusatz fördert die Verwendung von Medien ohne Proteinzusatz eine stärkere Zellproliferation und Proteinexpression und erleichtert die Aufreinigung von Produkten, die in einem nachgelagerten Prozess entstehen [10–12]. In Formulierungen wie MEM und RPMI-1640 ist kein Protein enthalten. Bei Bedarf kann jedoch ein Proteinzusatz verabreicht werden.

Kulturmedien und ihre Grundbestandteile

Kommerzielle Kulturmedien sind als Pulver oder in flüssiger Form erhältlich und enthalten häufig eine Vielzahl von Nährstoffen wie Aminosäuren, Glukose, Salze, Vitamine und andere Nahrungsergänzungsmittel. 

Der Bedarf an diesen Komponenten ist für jede Zelllinie unterschiedlich, und diese Unterschiede sind für die große Anzahl verschiedener Medienformulierungen verantwortlich. Jede Komponente erfüllt eine bestimmte Funktion, die in den folgenden Abschnitten erläutert wird:

Puffersysteme

Um optimale Wachstumsbedingungen aufrechtzuerhalten, muss der pH-Wert geregelt werden, was häufig durch eines von zwei Puffersystemen erfolgt:

Natürliches Puffersystem

Das CO₂/H₂CO₃-Verhältnis in der Atmosphäre entspricht dem des Mediums, wodurch ein natürlicher Puffermechanismus entsteht. Um diesen natürlichen Puffermechanismus zu erhalten, müssen die Kulturen in einer Luftumgebung mit 5–10 % CO₂ gehalten werden, was häufig durch den Einsatz eines CO₂-Inkubators erreicht wird. Einer der größten Vorteile der Verwendung eines natürlichen Puffers ist, dass er kostengünstig und sicher ist.

HEPES

Die chemische Pufferung mit dem Zwitterion HEPES weist im pH-Bereich von 7,2–7,4 eine höhere Pufferkapazität auf und erfordert keine regulierte Gasatmosphäre. Für bestimmte Zelltypen kann eine höhere HEPES-Dosis schädlich sein. HEPES-haltige Medien sind zudem wesentlich anfälliger für die phototoxischen Wirkungen von Leuchtstofflicht [13].

Phenolrot

Der pH-Indikator Phenolrot ist häufig in handelsüblichen Kulturmedien enthalten und ermöglicht eine kontinuierliche Überwachung des pH-Werts. Durch das Wachstum der Zellen bewirken die von diesen Zellen produzierten Stoffwechselprodukte eine Verschiebung des pH-Werts und damit eine Farbveränderung des Mediums. Phenolrot hat einen doppelten Effekt auf die Farbe des Mediums: Bei saurem pH-Wert färbt es sich gelb, bei alkalischem pH-Wert violett. Bei einem pH-Wert von 7,4 – dem optimalen Wert für die Zellkultur – erscheint das Medium fluoreszierend rot.

Phenolrot weist jedoch einige Nachteile auf: Erstens kann Phenolrot die Wirkung einer Reihe von Steroidhormonen, vor allem von Östrogen, simulieren [14]. Daher wird bei der Untersuchung östrogensensitiver Zellen wie Brustgewebe ein phenolrotfreies Medium empfohlen. In mehreren serumfreien Formulierungen wird das Natrium-Kalium-Gleichgewicht durch das Vorhandensein von Phenolrot gestört. Die Zugabe von Serum oder Rinderhypophysenhormon zum Medium kann diesem Effekt entgegenwirken [15]. Drittens wird der Nachweis in durchflusszytometrischen Experimenten durch das Vorhandensein von Phenolrot erschwert.

Anorganische Salze

Medien, die anorganische Salze wie Natrium-, Kalium- und Kalziumionen enthalten, tragen zur Aufrechterhaltung des osmotischen Gleichgewichts bei und regulieren das Membranpotenzial.

Aminosäuren

Da Aminosäuren die Grundbausteine von Proteinen sind, sind sie ein wesentlicher Bestandteil jedes jemals entwickelten Zellwachstumsmediums. Da Zellen bestimmte Aminosäuren nicht selbst produzieren können, ist es wichtig, dass das Kulturmedium essentielle Aminosäuren enthält. Sie sind für die Zellproliferation notwendig, und ihre Konzentration bestimmt die maximal erreichbare Zelldichte. Insbesondere L-Glutamin, eine essentielle Aminosäure, ist von entscheidender Bedeutung.

L-Glutamin dient als sekundäre Energiequelle für den Stoffwechsel und liefert Stickstoff für die Produktion von NAD, NADPH und Nukleotiden. Da L-Glutamin eine instabile Aminosäure ist, die sich mit der Zeit in eine Form umwandelt, die von den Zellen nicht verwertet werden kann, muss es dem Medium zugeführt werden.

Darüber hinaus können nicht essentielle Aminosäuren dem Medium zugeführt werden, um diejenigen wieder aufzufüllen, die während des Wachstumsprozesses verbraucht wurden. Das Wachstum der Zellen wird gefördert und ihre Lebensfähigkeit erhöht, wenn das Wachstumsmedium mit nicht essentiellen Aminosäuren angereichert wird.

Kohlenhydrate

Kohlenhydrate in Form von Zuckern sind die wichtigste Energiequelle. Viele Medien enthalten neben den gängigeren Zuckern Glukose und Galaktose auch Maltose und Fruktose.

Proteine und Peptide

Albumin, Transferrin und Fibronektin sind die am häufigsten verwendeten Proteine und Peptide. Sie sind besonders wichtig in Medien, die kein Serum enthalten. Albumin, Transferrin, Aprotinin, Fetuin und Fibronektin gehören zu den Proteinen, die im Serum vorkommen können, das eine reichhaltige Proteinquelle darstellt.

Albumin ist das Hauptprotein im Blut und hat die Aufgabe, verschiedene Substanzen – darunter Wasser, Salze, freie Fettsäuren, Hormone und Vitamine – zu binden und zwischen verschiedenen Organen und Zellen zu transportieren. Die Fähigkeit von Albumin, sich an chemische Substanzen zu binden, macht es zu einem wirksamen Mittel, um schädliche Verbindungen aus dem Kulturmedium zu entfernen.

Aprotinin ist ein Schutzmittel in Zellkultursystemen, da es bei neutralem und saurem pH-Wert stabil sowie resistent gegen hohe Temperaturen und die durch proteolytische Enzyme verursachte Zerstörung ist. Es ist in der Lage, eine Reihe von Serinproteasen, darunter unter anderem Trypsin, zu hemmen.

Fetuin ist ein Glykoprotein, das im Serum von Föten und Neugeborenen im Vergleich zum Serum von Erwachsenen in höheren Mengen nachgewiesen werden kann. Darüber hinaus wirkt es als Serinprotease-Inhibitor. Das Protein Fibronektin ist ein wesentlicher Bestandteil des Zelladhäsionsprozesses. Transferrin ist ein Protein, das Eisen transportiert und für die Zufuhr von Eisen zu den Zellmembranen verantwortlich ist.

Fettsäuren und Lipide

Sie spielen eine entscheidende Rolle in serumfreiem Medium, wenn kein Serum vorhanden ist.

Vitamine

Zahlreiche Vitamine sind für die Zellentwicklung und -proliferation notwendig. Vitamine können von den Zellen nicht in ausreichenden Mengen produziert werden und sind daher in der Gewebekultur als Nahrungsergänzungsmittel unverzichtbar.

In der Zellkultur ist das Serum die Hauptquelle für Vitamine; Medien werden jedoch auch mit verschiedenen Vitaminen angereichert, um sie für einen bestimmten Zelltyp geeignet zu machen. Am häufigsten werden Vitamine der B-Gruppe zur Wachstumsförderung eingesetzt.

Spurenelemente

Chemische Elemente wie Kupfer, Zink, Selen und Zwischenprodukte der Tricarbonsäure werden als Spurenelemente bezeichnet. Spurenelemente werden häufig Medien zugesetzt, die kein Serum enthalten, um diejenigen zu ersetzen, die typischerweise im Serum vorhanden sind. Diese Elemente sind wichtige chemische Bestandteile, die für eine gesunde Zellentwicklung erforderlich sind. Viele biochemische Reaktionen, wie beispielsweise die Enzymaktivität, hängen von bestimmten Mikronährstoffen ab.

Mediumzusätze

Das für bestimmte Zelllinien empfohlene vollständige Wachstumsmedium benötigt zusätzliche Komponenten, die im Basismedium und im Serum nicht enthalten sind. Diese Nahrungsergänzungsmittel unterstützen das Zellwachstum und eine angemessene Stoffwechselfunktion.

Obwohl Hormone, Wachstumsfaktoren und Signalmoleküle für die ordnungsgemäße Proliferation bestimmter Zelllinien unerlässlich sind, sollten stets die folgenden Vorsichtsmaßnahmen beachtet werden: Da die Zugabe von Zusätzen die Osmolalität des vollständigen Wachstumsmediums verändern kann, was die Zellentwicklung hemmen kann, ist es stets ratsam, die Osmolalität nach der Zugabe von Zusätzen zu überprüfen. Für die meisten Zelllinien liegt die optimale Osmolalität zwischen 260 und 320 mOSM/kg.

Antibiotika

Antibiotika werden häufig eingesetzt, um das Wachstum von bakteriellen und pilzlichen Kontaminanten zu hemmen [16], obwohl sie für das Zellwachstum nicht unbedingt erforderlich sind. Da Antibiotika eine Kontamination durch Mykoplasmen und resistente Bakterien verschleiern können, wird von ihrem routinemäßigen Einsatz in der Zellkultur abgeraten [17, 18].

Zudem können Antibiotika den Stoffwechsel empfindlicher Zellen stören. Häufig werden die von MilliporeSigma und Life Technologies hergestellten Penicillin-Streptomycin-Kombinationen verwendet. Plasmocin wurde bei der Kultivierung der Gliom-Zelllinien TS603, TS516 und BT260 eingesetzt [19] und hat sich bei der Beseitigung von Mykoplasmenkontaminationen als wirksam erwiesen (20).

Serum

Im Serum sind Albumine, Wachstumsfaktoren und Wachstumshemmer enthalten. Serum ist einer der wichtigsten Bestandteile des Zellkulturmediums, da es Aminosäuren, Proteine, Vitamine (insbesondere fettlösliche Vitamine wie A, D, E und K), Kohlenhydrate, Lipide, Hormone, Wachstumsfaktoren, Mineralstoffe und Spurenelemente liefert.

Serum aus fötalen und Kälberquellen wird häufig verwendet, um die Entwicklung von Kulturzellen zu fördern. Fötales Serum ist eine reichhaltige Quelle für Wachstumsfaktoren und eignet sich für das Klonen von Zellen sowie für die Entwicklung empfindlicher Zellen. Aufgrund seiner geringeren wachstumsfördernden Eigenschaften wird Kälberserum in Kontaktinhibitionsexperimenten eingesetzt. Normale Wachstumsmedien enthalten oft 2 % bis 10 % Serum. Die Zugabe von Serum zum Kulturmedium dient folgenden Zwecken [21]:

  • Das Serum liefert die für die Zellen essenziellen Nährstoffe (sowohl in gelöster Form als auch an Proteine gebunden).

  • Das Serum enthält verschiedene Wachstumsfaktoren und Hormone, die an der Wachstumsförderung und der spezifischen Zellaktivität beteiligt sind.

  • Es enthält zahlreiche Bindungsproteine wie Albumin und Transferrin, die andere Substanzen in die Zelle transportieren. So befördert beispielsweise Albumin Fette, Vitamine, Hormone usw. in die Zellen.

  • Es liefert zudem Proteine wie Fibronektin, die die Zelladhäsion am Substrat erhöhen. Darüber hinaus enthält es Ausbreitungsfaktoren, die die Zellausdehnung vor der Teilung unterstützen.

  • Es liefert Proteaseinhibitoren, die die Proteolyse in den Zellen verhindern.

  • Es enthält außerdem Mineralstoffe wie Na+, K+, Zn²⁺ und Fe²⁺.

  • Es erhöht die Viskosität des Mediums und schützt so die Zellen vor mechanischen Schäden während des Rührens in der Suspensionskultur.

  • Es wirkt zudem als Puffer.

Literaturhinweise

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Ernährung tierischer Zellen in der Gewebekultur; erste Untersuchungen an einem synthetischen Medium. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1–8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Schnelle Adsorption einer Komponente des fötalen Kälberserums durch Säugetierzellen in Kultur. Eine potenzielle Quelle für Artefakte bei Untersuchungen von Antiseren gegen zellspezifische Antigene. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Die Zugabe von Serum zum Medium für die Herstellung von Zellsuspensionen als mögliche Quelle für Artefakte bei zellvermittelten Reaktionen, untersucht mittels des Popliteal-Lymphknotentests. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Kommerzielle serumfreie Medien: Hybridomwachstum und Produktion monoklonaler Antikörper. J Immunol Methods. 1991;145:175–83

[5] Barnes D, Sato G. Methoden zur Kultivierung von Zellen in serumfreiem Medium. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, et al. HSP70-Chaperone transportieren RNA-freies TDP-43 in anisotrope, intranukleäre, flüssige, kugelförmige Hüllen. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, et al. Durch das Down-Syndrom induzierte Seneszenz stört die Kernarchitektur neuraler Vorläuferzellen. Cell Stem Cell. 2022;29:116–130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Vollständiger Ersatz von Serum durch Albumin, Transferrin und Sojalipid in Kulturen von Lipopolysaccharid-reaktiven B-Lymphozyten. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Systematische Verbesserung eines chemisch definierten, proteinfreien Mediums für das Hybridomwachstum und die Produktion monoklonaler Antikörper. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Ein proteinfreies Medium für das Wachstum von Hybridomen und anderen Zellen des Immunsystems. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Serumfreie Zellkultur: ein einheitlicher Ansatz. Cell. 1980;22:649–55

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