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FRTL
Gewebe
Thyroidea
Synonyme
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

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FRTL

Cell line · Artikelnummer 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

FRTL-Zellen (Fischer Rat Thyroid Low Serum) sind eine kontinuierliche Linie von follikulären Schilddrüsenzellen der Ratte, die zur Untersuchung verschiedener Aspekte der Schilddrüsenphysiologie und -pathologie gezüchtet wurden. Diese Zellen zeichnen sich besonders durch ihre Fähigkeit aus, Jodid intrazellulär zu akkumulieren, eine Schlüsseleigenschaft, die die Schilddrüsenfunktion in vivo widerspiegelt. Aufgrund dieser einzigartigen Eigenschaft eignen sie sich für Forschungsarbeiten, die sich auf die Biosynthese von Schilddrüsenhormonen, den Mechanismus des Jodidtransports und die Auswirkungen verschiedener Substanzen auf die Schilddrüsenfunktion konzentrieren.

Die Kulturbedingungen für FRTL-Zellen sind recht spezifisch und erfordern ein spezielles Medium, um ihre physiologischen Eigenschaften zu erhalten. Ergänzungen wie FBS, Insulin, Hydrocortison, Thyreotropin, Transferrin, Somatostatin und Glycyl-1-histidyl-Lysin-Acetat sind notwendig, um das hormonelle Umfeld der Schilddrüse nachzubilden. Diese präzise Kombination von Bedingungen unterstützt das typische Wachstumsmuster der Zellen, bei dem sie dazu neigen, sich übereinander zu stapeln und dreidimensionale Strukturen zu bilden, anstatt sich als Monolayer auszubreiten. Dieses Clusterverhalten ist von Bedeutung, da es die follikuläre Anordnung im natürlichen Schilddrüsengewebe nachahmt und somit ein genaueres Modell für die Untersuchung der Interaktionen und der Dynamik von Schilddrüsenzellen in einer kontrollierten Umgebung bietet.

Gewebe
Thyroidea
Synonyme
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Tumorauslösend
Nein
Karyotyp
Diploid
Verdopplungszeit
5-7 Tage

04Bezeichner

Quellenangabe
FRTL (Cytion Katalognummer 500202)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Expression und Anfälligkeit

Produkte
Thyreoglobulin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 0,5 % FBS, 10 mg/L Insulin, 5 mg/L Transferrin, 50 Mikrogramm/L Hydrocortison, 10 Mikrogramm/L Somatostatin, 10 Mikrogramm/L Gly-His-Lsy-Acetat, 0,0165 Mikrogramm/ml Rinder-TSH (Katalognummer T1614 von Scripps Laboratories) - Fügen Sie das benötigte TSH kurz vor der Verwendung hinzu und filtern Sie es steril in das Medium.
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Fischer
Alter des Spenders
6 Wochen