Siirry sisältöön
FRTL
Kudos
Thyroidea
Synonyymit
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Asiakirjat

FRTL

Cell line · Tuotenumero 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

FRTL-solut (Fischer Rat Thyroid Low Serum) ovat jatkuva rotan kilpirauhasen follikulaarisolujen linja, jota on viljelty kilpirauhasen fysiologian ja patologian eri näkökohtien tutkimiseksi. Nämä solut ovat erityisen merkittäviä, koska ne kykenevät keräämään jodidia solunsisäisesti, mikä on kilpirauhasen toimintaa in vivo kuvaava keskeinen ominaisuus. Tämän ainutlaatuisen ominaisuuden ansiosta ne soveltuvat kilpirauhashormonin biosynteesiä, jodidin kuljetusmekanismia ja eri aineiden vaikutuksia kilpirauhasen toimintaan käsittelevään tutkimukseen.

FRTL-solujen viljelyolosuhteet ovat varsin spesifiset, ja niiden fysiologisten ominaisuuksien ylläpitäminen edellyttää erikoistunutta elatusainetta. Lisäaineet, kuten FBS, insuliini, hydrokortisoni, tyrotropiini, transferriini, somatostatiini ja glycyl-1-histidyylilysiiniasetaatti, ovat välttämättömiä kilpirauhasen hormonaalisen ympäristön jäljittelemiseksi. Tämä täsmällinen olosuhteiden yhdistelmä tukee solujen tyypillistä kasvumallia, jossa ne pyrkivät kasaantumaan päällekkäin ja muodostamaan kolmiulotteisia rakenteita sen sijaan, että ne levittäytyisivät yksikerroksisina. Tämä klusteroitumiskäyttäytyminen on merkittävää, koska se jäljittelee luonnollisessa kilpirauhaskudoksessa esiintyvää follikulaarista asetelmaa ja tarjoaa siten tarkemman mallin kilpirauhassolujen vuorovaikutuksen ja dynamiikan tutkimiseen kontrolloidussa ympäristössä.

Kudos
Thyroidea
Synonyymit
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Ei
Karyotyyppi
Diploidinen
Kaksinkertaistumisaika
5-7 päivää

04Tunnisteet

Lähdeviite
FRTL (Cytionin luettelonumero 500202)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Ilmentyminen ja alttius

Tuotteet
Tyroglobuliini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820600a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennä elatusainetta 0,5 % FBS:llä, 10 mg/L insuliinilla, 5 mg/L transferriinilla, 50 mikrogrammaa/L hydrokortisonilla, 10 mikrogrammaa/L somatostatiinilla, 10 mikrogrammaa/L Gly-His-Lsy-asetaatilla, 0,0165 mikrogrammaa/ml naudan TSH:lla (luettelonumero T1614 Scripps Laboratories) - Lisää tarvittava määrä TSH:ta juuri ennen käyttöä ja suodata steriilisti elatusaineeseen.
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Fischer
Luovuttajan ikä
6 viikkoa