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FRTL
Tessuto
Tireoidea
Sinonimi
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Documenti

FRTL

Cell line · Codice prodotto 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) sono una linea continua di cellule follicolari tiroidee di ratto che sono state coltivate per studiare vari aspetti della fisiologia e della patologia tiroidea. Queste cellule si distinguono in particolare per la loro capacità di accumulare ioduro a livello intracellulare, una caratteristica chiave che riflette la funzione tiroidea in vivo. Questa caratteristica unica le rende adatte alla ricerca sulla biosintesi degli ormoni tiroidei, sul meccanismo di trasporto dello ioduro e sugli effetti di varie sostanze sulla funzione tiroidea.

Le condizioni di coltura delle cellule FRTL sono piuttosto specifiche e richiedono un terreno specializzato per mantenere le loro proprietà fisiologiche. Per riprodurre l'ambiente ormonale della ghiandola tiroidea sono necessari integratori come FBS, insulina, idrocortisone, tireotropina, transferrina, somatostatina e glicil-1-istidil-lisina acetato. Questa precisa combinazione di condizioni favorisce il tipico modello di crescita delle cellule, che tendono a impilarsi l'una sull'altra e a formare strutture tridimensionali piuttosto che diffondersi come un monostrato. Questo comportamento a grappolo è significativo perché imita la disposizione follicolare presente nel tessuto tiroideo naturale, fornendo così un modello più accurato per studiare le interazioni e le dinamiche delle cellule tiroidee in un ambiente controllato.

Tessuto
Tireoidea
Sinonimi
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tumorigenico
No
Cariotipo
Diploide
Tempo di raddoppio
5-7 giorni

04Identificatori

Riferimento bibliografico
FRTL (numero di catalogo Cytion 500202)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Espressione e suscettibilità

Prodotti
Tireoglobulina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12, w: 1,0 mM di glutammina stabile, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 1,1 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820600a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno con 0,5% FBS, 10 mg/L di insulina, 5 mg/L di transferrina, 50 microgrammi/L di idrocortisone, 10 microgrammi/L di somatostatina, 10 microgrammi/L di Gly-His-Lsy-acetato, 0,0165 microgrammi/mL di TSH bovino (numero di catalogo T1614 dei Laboratori Scripps) - Aggiungere il TSH richiesto appena prima dell'uso e filtrare sterilmente nel terreno.
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
3 volte a settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
Fischer
Età dei donatori
6 settimane