Mine otse sisu juurde
FRTL
Kude
Thyroidea
Sünonüümid
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumendid

FRTL

Cell line · Toote number 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) rakud on roti kilpnäärme folliikularakkude pidev liin, mida on kasvatatud kilpnäärme füsioloogia ja patoloogia erinevate aspektide uurimiseks. Need rakud on eriti tähelepanuväärsed oma võime poolest akumuleerida intratsellulaarselt jodiidi, mis on peamine omadus, mis peegeldab kilpnäärme funktsiooni in vivo. Tänu sellele ainulaadsele omadusele sobivad need rakud kilpnäärmehormooni biosünteesi, jodiidi transportimise mehhanismi ja erinevate ainete mõju kilpnäärme funktsioonile uurimiseks.

FRTL-rakkude kasvatustingimused on üsna spetsiifilised ja nõuavad nende füsioloogiliste omaduste säilitamiseks spetsiaalset keskkonda. Kilpnäärme hormonaalse keskkonna jäljendamiseks on vaja selliseid lisandeid nagu FBS, insuliin, hüdrokortisoon, türeotropiin, transferriin, somatostatiin ja glütsüül-1-histidüül-lüsiinatsetaat. See täpne tingimuste kombinatsioon toetab rakkude tüüpilist kasvumustrit, kus nad kipuvad üksteise peale kuhjuma ja moodustama kolmemõõtmelisi struktuure, mitte levima monokihina. Selline klastriline käitumine on oluline, kuna see jäljendab loomulikus kilpnäärmekoes esinevat folliikulist paigutust, pakkudes seega täpsemat mudelit kilpnäärmerakkude koostoimete ja dünaamika uurimiseks kontrollitud keskkonnas.

Kude
Thyroidea
Sünonüümid
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Tuumorigeenne
Ei
Karyotüüp
Diploidne
Kahekordistumisaeg
5-7 päeva

04Tunnused

Viide
FRTL (Cytioni katalooginumber 500202)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Tiroglobuliin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda 0,5% FBS, 10 mg/L insuliini, 5 mg/L transferriini, 50 mikrogrammi/L hüdrokortisooni, 10 mikrogrammi/L somatostatiini, 10 mikrogrammi/L Gly-His-Lsy-atsetaadi, 0,0165 mikrogrammi/ml veiste TSH (katalooginumber T1614 Scripps Laboratories) - Lisage vajalik TSH vahetult enne kasutamist ja filtreerige steriilselt keskkonda.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Fischer
Doonori vanus
6 nädalat