Gå direkte til indholdet
FRTL
Væv
Thyroidea
Synonymer
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumenter

FRTL

Cell line · Varenummer 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

FRTL-celler (Fischer Rat Thyroid Low Serum) er en kontinuerlig linje af follikulære celler fra rotternes skjoldbruskkirtel, som er blevet dyrket for at studere forskellige aspekter af skjoldbruskkirtlens fysiologi og patologi. Disse celler er særligt bemærkelsesværdige for deres evne til at akkumulere jodid intracellulært, en vigtig egenskab, der afspejler skjoldbruskkirtlens funktion in vivo. Denne unikke egenskab gør dem velegnede til forskning med fokus på biosyntese af skjoldbruskkirtelhormoner, mekanismen for jodidtransport og virkningerne af forskellige stoffer på skjoldbruskkirtelfunktionen.

Kulturbetingelserne for FRTL-celler er ret specifikke og kræver et specialiseret medium for at opretholde deres fysiologiske egenskaber. Tilskud som FBS, insulin, hydrokortison, thyrotropin, transferrin, somatostatin og glycyl-1-histidyl-lysinacetat er nødvendige for at genskabe det hormonelle miljø i skjoldbruskkirtlen. Denne præcise kombination af forhold understøtter cellernes typiske vækstmønster, hvor de har en tendens til at stable sig oven på hinanden og danne tredimensionelle strukturer i stedet for at sprede sig som et monolag. Denne klyngeadfærd er vigtig, da den efterligner det follikulære arrangement, der findes i naturligt skjoldbruskkirtelvæv, og dermed giver en mere nøjagtig model til undersøgelse af skjoldbruskkirtelcellers interaktioner og dynamik i en kontrolleret indstilling.

Væv
Thyroidea
Synonymer
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klassificering

Organisme
Rotte
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Tumorfremkaldende
Nej
Karyotype
Diploid
Fordoblingstid
5-7 dage

04Identifikatorer

Kildehenvisning
FRTL (Cytion katalognummer 500202)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Udtryk og modtagelighed

Produkter
Thyroglobulin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 0,5 % FBS, 10 mg/L insulin, 5 mg/L transferrin, 50 mikrogram/L hydrokortison, 10 mikrogram/L somatostatin, 10 mikrogram/L gly-his-sy-acetat, 0,0165 mikrogram/mL bovint TSH (katalognummer T1614 fra Scripps Laboratories) - Tilsæt det nødvendige TSH lige før brug, og sterilfiltrér det i mediet.
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
Fischer
Donorens alder
6 uger