Přejít na obsah
FRTL
Tkáň
Thyroidea
Synonyma
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumenty

FRTL

Cell line · Číslo výrobku 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buňky FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) jsou kontinuální linií folikulárních buněk štítné žlázy potkanů, které byly kultivovány ke studiu různých aspektů fyziologie a patologie štítné žlázy. Tyto buňky se vyznačují zejména schopností intracelulárně akumulovat jodidy, což je klíčová vlastnost odrážející funkci štítné žlázy in vivo. Díky této jedinečné vlastnosti jsou vhodné pro výzkum zaměřený na biosyntézu hormonů štítné žlázy, mechanismus transportu jodidu a účinky různých látek na funkci štítné žlázy.

Kultivační podmínky pro buňky FRTL jsou poměrně specifické a vyžadují specializované médium, aby byly zachovány jejich fyziologické vlastnosti. Pro replikaci hormonálního prostředí štítné žlázy jsou nezbytné doplňky, jako je FBS, inzulin, hydrokortizon, tyreotropin, transferin, somatostatin a glycyl-1-histidyl-lysin acetát. Tato přesná kombinace podmínek podporuje typický způsob růstu buněk, které mají tendenci se na sebe vršit a vytvářet trojrozměrné struktury, místo aby se rozprostíraly jako jednovrstvé. Toto shlukování je významné, protože napodobuje folikulární uspořádání, které se nachází v přirozené tkáni štítné žlázy, a poskytuje tak přesnější model pro studium interakcí a dynamiky buněk štítné žlázy v kontrolovaném prostředí.

Tkáň
Thyroidea
Synonyma
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Tumorogenní
Ne
Karyotyp
Diploidní
Doba zdvojnásobení
5-7 dní

04Identifikátory

Citace
FRTL (katalogové číslo Cytion 500202)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Exprese a náchylnost

Produkty
Tyreoglobulin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilní glutamin, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820600a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 0,5 % FBS, 10 mg/l inzulínu, 5 mg/l transferinu, 50 mikrogramů/l hydrokortizonu, 10 mikrogramů/l somatostatinu, 10 mikrogramů/l gly-His-Lsy-acetátu, 0,0165 mikrogramů/ml hovězího TSH (katalogové číslo T1614 od Scripps Laboratories) - Přidejte požadovaný TSH těsně před použitím a sterilně jej přefiltrujte do média.
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
Fischer
Věk dárce
6 týdnů