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FRTL
Tecido
Tiroidea
Sinónimos
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Documentos

FRTL

Cell line · Número do produto 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

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01Informações gerais

Descrição

As células FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) são uma linha contínua de células foliculares da tiroide de rato que têm sido cultivadas para estudar vários aspectos da fisiologia e patologia da tiroide. Estas células são particularmente notáveis pela sua capacidade de acumular iodeto intracelularmente, uma caraterística-chave que reflecte a função da tiroide in vivo. Esta caraterística única torna-as adequadas para a investigação centrada na biossíntese das hormonas da tiroide, no mecanismo de transporte de iodeto e nos efeitos de várias substâncias na função da tiroide.

As condições de cultura das células FRTL são bastante específicas, exigindo um meio especializado para manter as suas propriedades fisiológicas. São necessários suplementos como FBS, insulina, hidrocortisona, tirotropina, transferrina, somatostatina e acetato de glicil-1-histidil-lisina para reproduzir o ambiente hormonal da glândula tiroide. Esta combinação precisa de condições suporta o padrão de crescimento típico das células, em que estas tendem a empilhar-se umas sobre as outras e a formar estruturas tridimensionais em vez de se espalharem como uma monocamada. Este comportamento de agrupamento é significativo, uma vez que imita a disposição folicular encontrada no tecido natural da tiroide, proporcionando assim um modelo mais preciso para estudar as interações e a dinâmica das células da tiroide num ambiente controlado.

Tecido
Tiroidea
Sinónimos
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tumorigénico
Não
Cariótipo
Diploide
Tempo de duplicação
5-7 dias

04Identificadores

Referência
FRTL (número de catálogo Cytion 500202)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Expressão e suscetibilidade

Produtos
Tiroglobulina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12, com: 1,0 mM de glutamina estável, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 1,1 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820600a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 0,5% de FBS, 10 mg/L de insulina, 5 mg/L de transferrina, 50 microgramas/L de hidrocortisona, 10 microgramas/L de somatostatina, 10 microgramas/L de acetato de glicose-his-lsina, 0,0165 microgramas/mL de TSH bovina (número de catálogo T1614 da Scripps Laboratories) - Adicionar a TSH necessária imediatamente antes da utilização e filtrar estérilmente para o meio.
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
Fischer
Idade do dador
6 semanas