Ga naar de inhoud
FRTL
Weefsel
Thyroidea
Synoniemen
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Documenten

FRTL

Cell line · Productnummer 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cellen zijn een continue lijn van ratten schildklier follikel cellen die zijn gekweekt om verschillende aspecten van de schildklier fysiologie en pathologie te bestuderen. Deze cellen vallen vooral op door hun vermogen om intracellulair jodide te accumuleren, een belangrijk kenmerk dat de schildklierfunctie in vivo weerspiegelt. Deze unieke eigenschap maakt ze geschikt voor onderzoek gericht op de biosynthese van schildklierhormoon, het mechanisme van jodidetransport en de effecten van verschillende stoffen op de schildklierfunctie.

De kweekomstandigheden voor FRTL cellen zijn vrij specifiek en vereisen een gespecialiseerd medium om hun fysiologische eigenschappen te behouden. Supplementen zoals FBS, insuline, hydrocortison, thyrotropine, transferrine, somatostatine en glycyl-1-histidyllysineacetaat zijn nodig om de hormonale omgeving van de schildklier na te bootsen. Deze precieze combinatie van omstandigheden ondersteunt het typische groeipatroon van de cellen, waarbij ze de neiging hebben om op elkaar te stapelen en driedimensionale structuren te vormen in plaats van zich als een monolaag te verspreiden. Dit clustergedrag is belangrijk omdat het de folliculaire rangschikking nabootst die gevonden wordt in natuurlijk schildklierweefsel, waardoor een nauwkeuriger model ontstaat voor het bestuderen van schildkliercelinteracties en -dynamica in een gecontroleerde omgeving.

Weefsel
Thyroidea
Synoniemen
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Geen
Karyotype
Diploïde
Verdubbelingstijd
5-7 dagen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
FRTL (Cytion catalogusnummer 500202)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Expressie en vatbaarheid

Producten
Thyroglobuline

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiele Glutamine, w: 1,0 mM natriumpyruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 0,5% FBS, 10 mg/L Insuline, 5 mg/L Transferrine, 50 microgram/L Hydrocortison, 10 microgram/L Somatostatine, 10 microgram/L Gly-His-Lsy-acetaat, 0,0165 microgram/mL runder TSH (catalogusnummer T1614 van Scripps Laboratories) - Voeg het benodigde TSH vlak voor gebruik toe en filter steriel in het medium.
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 48 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Fischer
Leeftijd van de donor
6 weken