Prejsť na obsah
FRTL
Tkanivo
Thyroidea
Synonymá
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumenty

FRTL

Cell line · Číslo výrobku 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) sú kontinuálnou líniou folikulárnych buniek štítnej žľazy potkanov, ktoré boli kultivované na štúdium rôznych aspektov fyziológie a patológie štítnej žľazy. Tieto bunky sa vyznačujú najmä schopnosťou hromadiť jodidy intracelulárne, čo je kľúčová vlastnosť odrážajúca funkciu štítnej žľazy in vivo. Vďaka tejto jedinečnej vlastnosti sú vhodné na výskum zameraný na biosyntézu hormónov štítnej žľazy, mechanizmus transportu jodidov a účinky rôznych látok na funkciu štítnej žľazy.

Kultivačné podmienky pre bunky FRTL sú pomerne špecifické a vyžadujú si špecializované médium na zachovanie ich fyziologických vlastností. Na replikáciu hormonálneho prostredia štítnej žľazy sú potrebné doplnky ako FBS, inzulín, hydrokortizón, tyreotropín, transferín, somatostatín a glycyl-1-histidyl-lyzín acetát. Táto presná kombinácia podmienok podporuje typický spôsob rastu buniek, ktoré majú tendenciu ukladať sa jedna na druhú a vytvárať trojrozmerné štruktúry namiesto toho, aby sa rozprestierali ako monovrstva. Toto zhlukovanie je významné, pretože napodobňuje folikulárne usporiadanie, ktoré sa nachádza v prirodzenom tkanive štítnej žľazy, čím poskytuje presnejší model na štúdium interakcií a dynamiky buniek štítnej žľazy v kontrolovanom prostredí.

Tkanivo
Thyroidea
Synonymá
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Tumorigenický
Nie
Karyotyp
Diploidné
Doba zdvojnásobenia
5-7 dní

04Identifikátory

Citácia
FRTL (katalógové číslo Cytion 500202)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Prejav a náchylnosť

Produkty
Tyreoglobulín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilný glutamín, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion číslo výrobku 820600a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium 0,5 % FBS, 10 mg/l inzulínu, 5 mg/l transferínu, 50 mikrogramov/l hydrokortizónu, 10 mikrogramov/l somatostatínu, 10 mikrogramov/l gly-His-Lsy-acetátu, 0,0165 mikrogramu/ml hovädzieho TSH (katalógové číslo T1614 od Scripps Laboratories) - Požadovaný TSH pridajte tesne pred použitím a sterilne prefiltrujte do média.
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v množstve 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilepiť sa najmenej 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
Fischer
Vek darcu
6 týždňov