Tartalomra ugrás
FRTL
Szövet
Thyroidea
Szinonimák
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumentumok

FRTL

Cell line · Termékszám 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

Az FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) sejtek a patkány pajzsmirigy tüszősejtek folyamatos vonalát jelentik, amelyeket a pajzsmirigy fiziológiájának és patológiájának különböző aspektusainak tanulmányozására tenyésztettek. Ezek a sejtek különösen figyelemre méltóak a jodid intracelluláris felhalmozására való képességük miatt, ami a pajzsmirigy in vivo működését tükröző kulcsfontosságú jellemző. Ez az egyedülálló tulajdonság alkalmassá teszi őket a pajzsmirigyhormon bioszintézisével, a jodid transzport mechanizmusával és a különböző anyagok pajzsmirigyműködésre gyakorolt hatásával kapcsolatos kutatásokra.

Az FRTL sejtek tenyésztési körülményei meglehetősen specifikusak, és speciális táptalajt igényelnek fiziológiai tulajdonságaik fenntartásához. A pajzsmirigy hormonális környezetének reprodukálásához olyan kiegészítőkre van szükség, mint az FBS, inzulin, hidrokortizon, tirotropin, transzferrin, szomatosztatin és glicil-1-hisztidil-lizin-acetát. A körülményeknek ez a pontos kombinációja támogatja a sejtek tipikus növekedési mintázatát, ahol a sejtek hajlamosak egymásra rakódni és háromdimenziós struktúrákat alkotni, ahelyett, hogy monorétegként terjednének. Ez a klaszteres viselkedés azért jelentős, mert utánozza a természetes pajzsmirigyszövetben található tüszőszerű elrendeződést, így pontosabb modellt biztosít a pajzsmirigysejtek kölcsönhatásainak és dinamikájának kontrollált környezetben történő tanulmányozásához.

Szövet
Thyroidea
Szinonimák
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Daganatképző
Nem
Kariotípus
Diploid
Kettőzési idő
5-7 nap

04Azonosítók

Hivatkozás
FRTL (Cytion katalógusszám: 500202)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Kifejeződés és fogékonyság

Termékek
Thyroglobulin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
Egészítse ki a táptalajt 0,5% FBS-szel, 10 mg/L inzulinnal, 5 mg/L transzferrinnel, 50 mikrogramm/L hidrokortionnal, 10 mikrogramm/L szomatosztatinnal, 10 mikrogramm/L Gly-His-Lsy-acetáttal, 0,0165 mikrogramm/mL szarvasmarha TSH-val (katalógusszám: T1614 a Scripps Laboratories-tól) - A szükséges TSH-t közvetlenül a felhasználás előtt adja hozzá, és steril szűrje a táptalajba.
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
heti 3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel a lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felépüljenek a fagyasztási folyamatból, és legalább 48 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
Fischer
Az adományozó életkora
6 hét