Przejdź do treści
FRTL
Chusteczka
Thyroidea
Synonimy
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumenty

FRTL

Cell line · Numer produktu 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) to ciągła linia szczurzych komórek pęcherzykowych tarczycy, które zostały wyhodowane w celu zbadania różnych aspektów fizjologii i patologii tarczycy. Komórki te są szczególnie godne uwagi ze względu na ich zdolność do gromadzenia jodków wewnątrzkomórkowych, co jest kluczową cechą odzwierciedlającą funkcjonowanie tarczycy in vivo. Ta unikalna cecha sprawia, że są one odpowiednie do badań nad biosyntezą hormonów tarczycy, mechanizmem transportu jodków i wpływem różnych substancji na czynność tarczycy.

Warunki hodowli komórek FRTL są dość specyficzne i wymagają specjalistycznej pożywki w celu utrzymania ich właściwości fizjologicznych. Suplementy takie jak FBS, insulina, hydrokortyzon, tyreotropina, transferyna, somatostatyna i octan glicylo-1-histydylo-lizyny są niezbędne do odtworzenia środowiska hormonalnego tarczycy. Ta precyzyjna kombinacja warunków wspiera typowy wzorzec wzrostu komórek, w którym mają one tendencję do układania się jedna na drugiej i tworzenia trójwymiarowych struktur zamiast rozprzestrzeniania się jako jednowarstwowe. To zachowanie klastrowe jest istotne, ponieważ naśladuje układ pęcherzykowy występujący w naturalnej tkance tarczycy, zapewniając w ten sposób dokładniejszy model do badania interakcji i dynamiki komórek tarczycy w kontrolowanych warunkach.

Chusteczka
Thyroidea
Synonimy
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Nie
Karyotyp
Diploid
Czas podwojenia
5-7 dni

04Identyfikatory

Źródło
FRTL (numer katalogowy Cytion 500202)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Ekspresja i podatność

Produkty
Tyroglobulina

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnej glutaminy, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 1,1 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820600a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 0,5% FBS, 10 mg/L insuliny, 5 mg/L transferyny, 50 mikrogram/L hydrokortyzonu, 10 mikrogram/L somatostatyny, 10 mikrogram/L octanu Gly-His-Lsy, 0,0165 mikrogram/mL bydlęcego TSH (numer katalogowy T1614 od Scripps Laboratories) - Dodać wymagany TSH tuż przed użyciem i sterylnie przefiltrować do pożywki.
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Fischer
Wiek dawcy
6 tygodni