Preskoči na vsebino
FRTL
Tkivo
Thyroidea
Sinonimi
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumenti

FRTL

Cell line · Številka izdelka 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celice FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) so neprekinjena linija folikularnih celic ščitnice podgan, ki so jih gojili za preučevanje različnih vidikov fiziologije in patologije ščitnice. Te celice se še posebej odlikujejo po sposobnosti znotrajceličnega kopičenja jodida, kar je ključna značilnost, ki odraža delovanje ščitnice in vivo. Zaradi te edinstvene lastnosti so primerne za raziskave biosinteze ščitničnih hormonov, mehanizma prenosa jodida in učinkov različnih snovi na delovanje ščitnice.

Pogoji gojenja celic FRTL so precej specifični in zahtevajo specializirano gojišče za ohranjanje njihovih fizioloških lastnosti. Dodatki, kot so FBS, inzulin, hidrokortizon, tirotropin, transferin, somatostatin in glicil-1-histidil-lizin acetat, so potrebni za repliciranje hormonskega okolja ščitnice. Ta natančna kombinacija pogojev podpira značilen vzorec rasti celic, ki se zlagajo druga na drugo in tvorijo tridimenzionalne strukture, namesto da bi se širile kot enoplastne. To kopičenje je pomembno, saj posnema folikularno razporeditev, ki jo najdemo v naravnem ščitničnem tkivu, in tako zagotavlja natančnejši model za preučevanje interakcij in dinamike ščitničnih celic v nadzorovanem okolju.

Tkivo
Thyroidea
Sinonimi
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Tumorigeničen
Ne
Kariotip
Diploidni
Čas podvojitve
5-7 dni

04Identifikatorji

Navajanje vira
FRTL (Cytionova kataloška številka 500202)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Izražanje in dovzetnost

Izdelki
Tiroglobulin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnega glutamina, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 1,1 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820600a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 0,5 % FBS, 10 mg/L insulina, 5 mg/L transferina, 50 mikrogramov/L hidrokortizona, 10 mikrogramov/L somatostatina, 10 mikrogramov/L gli-His-Lsi-acetata, 0,0165 mikrogramov/ml govejega TSH (kataloška številka T1614 iz laboratorijev Scripps) - Potrebni TSH dodajte tik pred uporabo in sterilno filtrirajte v gojišče.
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo za najmanj 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Fischer
Starost darovalca
6 tednov